WWW.DISS.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
(Авторефераты, диссертации, методички, учебные программы, монографии)

 

Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 |

«С.Ю. Гармонов, Н.С. Шитова, Л.М. Юсупова КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА И БЕЗОПАСНОСТЬ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ Учебное пособие Казань КГТУ 2008 УДК 615:658.012.7(075) ББК 52.81:30.607(075) Г 20 ...»

-- [ Страница 5 ] --

Полужесткие гели синтезируют сополимеризацией стирола и дивинилбензола (стирогели) или полимеризацией винилацетата (поливинилацетатные гели). Сорбенты, полученные на основе этих гелей, выдерживают значительно более высокие давления, чем мягкие гели, и находят применение в колонках гель-хроматографов. Полужесткие гели в отличие от гидрофильных мягких гелей применимы при элюировании органическими растворителями.

Жесткие гели – это стекла или силикагели с фиксированными размерами пор. Такие гели устойчивы в эксплуатации и не изменяются при повышенных давлениях и температурах, однако характеризуются высокой адсорбционной активностью. Для ее снижения жесткие гели предварительно обрабатывают специальными реактивами, действующими на поверхность сорбента.

Гель-хроматография применяется для определения молекулярно-массового распределения полимеров в ЛФ и установления размеров их молекул. Для решения задачи применяют метод градуировочного графика, который имеет сложный вид и описывает зависимость удерживаемого объема от молекулярной массы или размера молекул. По графику находят содержание молекул определенного размера в анализируемой смеси.

Гель-хроматография используется для разделения сложных смесей органических веществ, например углеводов с различными молекулярными массами (крахмал, водорастворимые сахара). В фармацевтической промышленности этот метод применяется для анализа исходного растительного сырья, а также для оценки качества готовой продукции. Несмотря на относительную простоту выполнения гель-хроматография используется для решения такой сложной задачи, как контроль процесса ферментационной деструкции белковых веществ, полипептидов и других высокомолекулярных соединений. Определение базируется на разделении смеси высокомолекулярных и низкомолекулярных редуцирующих сахаров (например, полисахаридов, три-, ди- и моносахаридов) или при отделении крахмала от низкомолекулярных компонентов методом гель-хроматографии, основанное на различиях в молекулярных массах разделяемых соединений.

Оптические методы анализа, основанные на взаимодействии лучистой энергии с анализируемым веществом, являются высокочувствительными методами, позволяющими определять микро- и макроколичества различных ЛВ. Одним из вариантов оптических методов является метод УФ- и видимой спектроскопии, основанный на взаимодействии вещества с излучениями ультрафиолетовой и видимой областей электромагнитного спектра, а именно – на избирательном поглощении электромагнитного излучения однородными нерассеивающими системами.

Инфракрасная (ИК) область электромагнитного спектра, используемая в фармацевтическом анализе, охватывает интервал 4000–250 см–1.

В результате избирательного поглощения одной или нескольких длин волн из сплошного излучения система приобретает определенный цвет. О величине поглощения визуально судят по интенсивности этой окраски, а метод, основанный на использовании немонохроматических излучений, называется фотоколориметрическим. В отличие от этого метод, основанный на работе с монохроматизированными электромагнитными излучениями, называется спектрофотометрическим.

В настоящее время абсорбционная спектроскопия основана, главным образом, на измерении монохроматических излучений, что имеет ряд преимуществ по сравнению с использованием источников сплошных излучений. Большинство выпускаемых промышленностью приборов имеет устройство для монохроматизации излучения (специальные монохроматоры или светофильтры). Изучая поглощение данной системой монохроматических излучений различных длин волн, можно получить спектр поглощения, т.е. зависимость величины поглощения от длины волны. Поскольку величины поглощения многих ЛВ обычно очень малы, в практике спектрофотометрии используют различные химические реакции, которые приводят к образованию соединений, растворы которых обладают значительным поглощением в одном из участков спектра, т.е. проводят спектрохимическую реакцию (см. главу 4). К реакциям, используемым в спектрофотометрическом методе анализа, предъявляют в основном те же требования, что и к любым другим, применяемым в аналитической химии ЛВ. Особое значение имеют такие свойства, как специфичность, чувствительность, хорошая воспроизводимость окраски и ее устойчивость во времени.

Любое спектрофотометрическое определение состоит из трех этапов:

– переведение анализируемой пробы в раствор;

– получение окрашенного соединения;

– измерение светопоглощения используемого раствора.

Если пропустить через слой вещества (в частном случае раствора) пучок света с интенсивностью I0, то после прохождения его интенсивность уменьшится до Il. Бугер, а вслед за ним Ламберт, установили, что интенсивность прошедшего через слой пучка света связана с первоначальной следующим образом:

где l – толщина слоя, k – коэффициент пропорциональности.

Второй закон поглощения электромагнитного излучения установлен Бером и выражает связь между интенсивностью монохроматического потока и концентрацией вещества в поглощающем растворе: поглощение потока электромагнитного излучения прямо пропорционально числу частиц поглощающего вещества, через которое проходит поток этого излучения.

Следовательно, где – коэффициент поглощения.

Объединенный закон Бугера-Ламберта-Бера выражается уравнением Полученную величину называют оптической плотностью поглощающего вещества и обозначают буквой А. Тогда Отношение Il/I0 называют пропусканием раствора и обозначают буквой Т. Обычно Т выражают в процентах, тогда При графическом изображении зависимости оптической плотности от концентрации (при постоянной величине l) получается прямая линия. Она проходит через начало координат при отсутствии поглощения света растворителем и систематических ошибок. Следует особо подчеркнуть, что такая зависимость строго соблюдается только для монохроматических излучений. Как уже упоминалось, поглощение раствора, т.е. его оптическая плотность, является также функцией длины волны поглощенного света (рис. 16). Полученная таким образом спектральная характеристика раствора дает возможность выбрать оптимальную длину волны для более точных измерений оптической плотности (max).

Величина называется молярным коэффициентом поглощения. Молярный коэффициент поглощения зависит от природы окрашенного вещества и характеризует чувствительность соответствующей фотометрической реакции. Для реакций, используемых в фотометрии, имеет обычно порядок а при С = 1 M и l = 1 см А =. Молярный коэффициент поглощения является также функцией длины волны.

Важным дополнением к закону Бугера-Ламберта-Бера является закон аддитивности.

В соответствии с этим законом оптическая плотность смеси соединений, подчиняющихся закону Бугера-Ламберта-Бера и не вступающих в химическое взаимодействие друг с другом, равна сумме парциональных оптических плотностей, отвечающих поглощению света каждым из соединений Рис. 16. Спектры поглощения 4,6-динитробензофуроксановых (3) и 5,7-динитробензофуразановых (1,2,4) производных лекарственных веществ: 1 - натриевая соль бензилпенициллина; 2 - N,Nдибензилэтилендиаминовая соль бензилпенициллина; 3 - новокаиновая соль бензилпенициллина; 4 - новокаиновая соль бензилпенициллина. Растворитель: метанол-вода (30:70%, об.). Концентрация, моль/л: 1 - 10-4, 2 - 5 10-5; 3 - 10-5; 4 - 10- Принцип аддитивности положен в основу количественного анализа многокомпонентных лекарственных смесей.

Чувствительность фотометрических методов довольно высока. Минимальную определяемую концентрацию обычно рассчитывают по соотношению если принять Amin = 0,01, l = 1 см и =10, то Величина минимально определяемой концентрации может быть снижена, если 103, что бывает достаточно часто.

Точность фотометрических методов в зависимости от индивидуальных особенностей фотометрической реакции, применяемого прибора и других факторов изменяется в довольно широких пределах. Обычная погрешность фотометрических методов составляет примерно 1–2%.

ИК-спектроскопия в последнее время все чаще применяется для анализа различных классов ЛВ. Поскольку совокупность всех полос поглощения, образующая ИК-спектр данного вещества, однозначно определяет его индивидуальность, ИК-спектроскопия используется в основном как метод испытания на подлинность.

Подготовка образца для анализа является наиболее важным моментом при определениях в ИК-области спектра. Жидкие вещества можно испытывать непосредственно или в подходящем растворе. Ни один растворитель при достаточной толщине слоя полностью непрозрачен во всей области ИК-спектра. Чаще всего используют четыреххлористый углерод, хлороформ и дихлорметан. При интерпретации спектров необходимо учитывать возможное перекрывание полос поглощения вещества за счет поглощения растворителя.

Почти все современные фармакопеи рекомендуют проводить испытание на подлинность методом ИК-спектроскопии, предписывая при этом использование стандартного образца данного ЛВ. Анализ сводится к последовательному снятию спектров аналогичным образом приготовленных проб испытуемого вещества и его стандартного образца.

Совпадение полос двух спектров свидетельствует об идентичности данных веществ. Если эти положения не согласуются, то возникает предположение о возможности существования различий в кристаллической форме. Далее следует провести определение в растворе и вновь сопоставить спектры. Если определение в растворе невозможно, можно попытаться получить одинаковую кристаллическую форму путем перекристаллизации испытуемого вещества и стандартного образца.

Некоторые фармакопеи допускают установление подлинности по спектру сравнения.

Для этого составляются сборники спектров (атласы), в которых, помимо спектров, должны быть указаны точные условия приготовления пробы. Для того чтобы сделать допуск на возможную разницу в калибровке шкалы длин волн между прибором, на котором был получен спектр сравнения и спектр испытуемого вещества, используют стандартный спектр пленки полистирола. Этот спектр накладывают на спектр исследуемого вещества и на спектр сравнения. Наибольшее отклонение, возникающее из-за различий в разрешающей силе прибора, может отмечаться в области от 4000 до 2000 см–1.

В тех случаях, когда отсутствует стандартный образец или не опубликован атлас спектров, допускается приводить в нормативной документации рисунок спектра с указанием условий его снятия. Для установления подлинности должно выполняться требование полного совпадения полученного в эксперименте спектра со спектром, приведенным на рисунке.

Идентификация ЛВ методом ИК-спектроскопии в общем случае приводит к сопоставлению полученных спектров, однако знание основных групповых частот может быть полезным при первичной оценке полученных спектров. Такие групповые частоты связаны с наличием в структуре вещества определенных функциональных групп (табл. 10).

Для оценки ИК-спектра вазелинового масла, применяемого для приготовления паст ЛВ, получают спектр вазелинового масла в чистом виде и производят отнесение полос поглощения. Вазелиновое масло состоит из насыщенных углеводородов. На спектре отмечают валентные колебания и 1375 см–1, слабая полоса при 722 см–1.

Таблица 10. Некоторые функциональные группы и В качестве иллюстрации метода рассмотрим изучение ИК-спектров -лактамидов. В данном случае получают спектр натриевых солей бензилпенициллина и оксациллина, используя в качестве пробы пасту с вазелиновым маслом. Общие характеристические полосы поглощения пенициллинов находятся в области 1800–1500 см–1, на которую приходится интенсивная полоса поглощения при 1775–1755 см–1, соответствующая -лактамному кольцу, сопряженному с тиазоловым циклом.

Амидная группа пенициллинов обусловливает первую и вторую амидные полосы вторичного нециклического амида соответственно в областях 1690–1645 см–1, вызванные валентными колебаниями С=О, и 1585–1550 см–1, соответствующие деформационным колебаниям NH-группы.

Большинство пенициллинов является солями, поэтому в препаратах этой группы карбоксильные группы ионизированы, что подтверждается наличием полосы при 1615– см–1.

Наличие полос поглощения в области 3500–3200 см–1 иногда обусловлено валентными колебаниями свободной гидроксильной группы, на характер которой могут влиять водородные связи, а также колебания вторичных амидов и аминов.

Для ИК-спектров оксациллина натриевой соли кристаллогидрата характерны четко выраженные полосы поглощения, соответствующие общим группировкам пенициллинов.

Так, интенсивная полоса поглощения при 1760 см–1 обусловлена наличием -лактамной 1645 см–1 – наличием амидной группы. Полоса интенсивного поглощения при 1600 см– обусловлена валентными колебаниями ионизированной карбоксильной группы. Для ИКспектров пенициллинов в области 1600–1500 см–1 характерно также наличие сильной полосы – около 1550 см–1, соответствующей вторичной амидной группировке. Кроме того, в области 4000–3000 см–1 имеется интенсивная полоса при 3410 см–1, соответствующая валентным колебаниям NH-группы вторичного амида. Натриевая соль оксациллина для инъекций, получаемая лиофильной сушкой, имеет ИК-спектр, отличающийся от кристаллогидрата. Широкая полоса поглощения при 3380–3400 см–1 с максимумом 3400 см–1 указывает на наличие оксациллина, частично потерявшего при сушке воду. При дальнейшей перекристаллизации вещества получают спектр, присущий кристаллогидрату.

Другим примером являются кортикостероиды, применяемые в фармации в виде сложных эфиров. Рассмотрим наиболее типичный для этой группы ИК-спектр дезоксикортикостерона ацетата (ДОКА). Основным структурным группировкам дезоксикортикостерона соответствуют следующие полосы поглощения в области 1800–1600 см–1: полоса средней степени интенсивности при 1605 см–1, обусловленная валентными колебаниями группировки при С–4; интенсивная полоса поглощения при 1684 см–1, обычно относимая к группе О=О при С–20. Ацетильная группа проявляется в виде полосы сильной степени интенсивности в области 1800–1600 см–1 при 1733 см–1 (валентные колебания группы С=О) и широкой полосы при 1231 см–1 (группа С–О ацетильного остатка). Как и следовало ожидать, в спектре ДОКА отсутствует полоса поглощения при 3480 см–1, характерная для валентных колебаний ОН-группы.

Потенциометрия – это электрохимический метод анализа, основанный на измерении электродного потенциала, зависящего от концентрации потенциалопределяющего компонента – ЛВ в растворе.

Возникновение потенциала связано с электрохимическим процессом, происходящим при погружении электрода в раствор, содержащий, например, какую-нибудь окислительно-восстановительную систему. Если электрод выполнен из металла, то на его поверхности происходит процесс обмена электронами с окисленными (Окс) или восстановленными (Вос) компонентами данной системы. Это имеет место, если сам металл не подвергается в данных условиях непосредственно окислению или восстановлению, но обладает электронной проводимостью. Таким требованиям отвечают электроды из благородных металлов, например, Pt. Электрохимическая реакция на поверхности электрода может быть записана в виде:

В результате некоторая часть восстановителя окисляется, отдавая свои электроны металлу, а часть окислителя восстанавливается, принимая электроны. Эти процессы на границе раздела двух фаз металл – раствор протекают одновременно. В зависимости от соотношения концентраций (CОКС И Свос) на границе металл-раствор возникает избыточный отрицательный или положительный заряд, притягивающий электростатическими силами разное количество противоположно заряженных компонентов редокс-системы которые, располагаясь на поверхности металла, создают двойной электрический слой. В момент динамического равновесия, когда скорости отдачи и присоединения электронов компонентами окислительно-восстановительной пары становятся равными, электрод приобретает так называемый равновесный потенциал (Eравн), зависящий от концентраций, а точнее, от активностей редокс-системы в приэлектродном пространстве – аокс и авос. Математическое выражение для равновесного потенциала выведено Нернстом и имеет вид где Е окс/вос – стандартный потенциал редокс-системы, равный Еравн при условии аокс = авос = 1; n – число электронов, принимающих участие в электрохимической реакции.

Уравнение Нернста справедливо для обратимых систем, т.е. таких, в которых скорость электродных процессов очень большая. Для таких систем достаточно незначительного изменения потенциала электрода от равновесного состояния, чтобы вызвать увеличение скорости электроокисления или электровосстановления соответствующих компонентов.

Системы, обладающие весьма малыми скоростями обмена электронами, называются необратимыми. Равновесные потенциалы таких систем устанавливаются медленно (во времени), они и неустойчивы (дрейфуют), так как подвержены влиянию посторонних факторов.

Практическим критерием обратимости или необратимости редокс-системы является точность, с которой уравнением Нернста описывается зависимость равновесных потенциалов электродов от активностей (концентраций компонентов, участвующих в электродных реакциях.

Кроме ионов окислителя и восстановителя редокс-системы в реакциях могут участвовать ионы водорода, молекулы тех или иных веществ (например, Н2О) и т.д. Участвующие в реакции компоненты могут представлять твердую фазу (металл электрода, оксид металла, малорастворимая соль, покрывающая электрод, осадок) или газообразное вещество.

Тогда в уравнении Нернста не вводятся активности (концентрации) тех компонентов, для которых они постоянны, т.е. для твердой фазы, газообразного вещества и воды.

Различают два метода потенциометрии: прямую потенциометрию и потенциометрическое титрование.

Метод прямой потенциометрии основан на измерении точной величины электродного потенциала (Eравн) и нахождении по уравнению Нернста активности потенциалопределяющего иона в растворе. Наиболее широкое применение в фармацевтической химии этот метод находит для определения активности ионов водорода (рН растворов).

Потенциометрическое титрование основано на измерении изменяющегося в процессе химической реакции электродного потенциала исследуемой системы. Метод потенциометрического титрования по сравнению с визуальными титриметрическими методами обладает рядом преимуществ:

– как инструментальный метод он исключает субъективные ошибки, связанные с визуальным определением конечной точки титрования (к.т.т.);

– более чувствителен, т.е. при той же точности можно определять меньшие количества вещества;

– позволяет осуществлять титрование в мутных и окрашенных растворах, когда затруднительно или вовсе исключено использование цветных индикаторов;

– дает возможность дифференцированно (последовательно) определять смесь веществ из одной порции раствора при определенных условиях;

– допускает автоматизацию процесса титрования.

В потенциометрическом титровании, как и в визуальной титриметрии, могут быть использованы все четыре типа химических реакций: кислотно-основные, окислениявосстановления, осаждения и комплексообразования.

К химической реакции, применяемой в потенциометрическом титровании, предъявляются те же требования, что и в обычном титриметрическом методе:

– скорость химической реакции должна быть достаточно большой;

– строгая стехиометричность;

– достаточно большое значение константы равновесия, при этом условии реакция количественно протекает в нужном направлении;

– отсутствие побочных реакций.

Кроме перечисленного, необходимо располагать каким-либо способом обнаружения к.т.т. Индикатором в методе потенциометрического титрования является электрод, на котором протекает электрохимическая реакция (индикаторная).

В потенциометрическом титровании показателем достижения точки эквивалентности (т.э.) является резкое изменение потенциала электрода (скачок потенциала), связанное с возникновением другой электрохимической реакции на поверхности раздела электрод – раствор. Это дает возможность найти к.т.т. по кривой титрования.

Индикаторными электродами называются такие электроды, при помощи которых измеряют потенциал, возникающий при погружении их в исследуемый раствор. По величине потенциалов определяют активности потенциалопределяющих веществ, а также наблюдают за изменением в процессе химической реакции концентрации вещества, участвующего в электрохимической реакции. В зависимости от типа химической реакции при потенциометрическом титровании применяют различные индикаторные электроды.

В окислительно-восстановительных реакциях индикаторные электроды должны служить лишь передатчиками электронов и сами непосредственно в электрохимической реакции не участвовать. Таким требованиям отвечают электроды из благородных металлов:

платины и золота.

В кислотно-основном титровании в процессе химической реакции происходит изменение концентрации водородных ионов или рН в растворе, поэтому потенциал индикаторного электрода должен зависеть от концентрации Н+, т.е. функционировать как водородный электрод (обратимый относительно Н+-ионов). К таким электродам, кроме водородного, относится стеклянный электрод.

Стеклянный электрод по механизму действия относится к мембранным. Он представляет собой стеклянную трубку, на конце которой имеется шарик с очень тонкими стенками. Шарик заполнен соответствующим раствором, в который погружен подходящий индикаторный электрод (например, хлорид-серебряный в растворе определенной концентрации ионов хлора). Внешнюю поверхность электрода приводят в соприкосновение с испытуемым раствором.

На поверхности раздела между тонкой мембраной из стекла специального состава и раствором возникает разность потенциалов, величина которой является функцией активности ионов водорода в растворе (хотя в данном случае механизм ее возникновения не является электрохимическим), математически описываемая уравнением Нернста У правильно функционирующих стеклянных электродов в широком диапазоне шкалы рН Е0ст сохраняет свое постоянство. К преимуществам стеклянного электрода относится возможность измерения рН растворов, содержащих сильные окислители и восстановители.

Потенциометрическое титрование широко применяется в фармацевтическом анализе ЛВ (субстанций, ЛФ, исходного сырья при синтезе ЛВ). Примеры используемых при этом реакций и возможностей анализа различных групп ЛВ представлены в главе 6.

Одной из важнейших задач фармацевтической химии является создание высокопроизводительных систем автоматического контроля, позволяющих проводить чувствительные и избирательные определения ЛВ в различных объектах. Весьма перспективно использование для этих целей систем проточно-инжекционного анализа (ПИА), открывающего широкие возможности для изучения процессов биотрансформации лекарственных препаратов в организме человека, контроля качества фармацевтических продуктов и регулирования процессов на всех стадиях производства ЛВ, терапевтического и токсикологического мониторинга ксенобиотиков в биологических средах. Этому способствуют такие преимущества ПИА, как простота принципов и исполнения, высокая производительность и экономичность определений, возможность получения большого объема аналитической информации.

ПИА основан на введении дискретных микрообъемов анализируемого образца в непрерывно движущийся ламинарный поток раствора носителя и/или реагента. При этом в потоке возникает контролируемый градиент концентрации анализируемого компонента образца, который детектируется различными методами в виде пика, как в хроматографии, с характерным профилем. Во многих случаях используется обращенный вариант ПИА, в котором реагент инжектируется в поток образца. Из соответствующих резервуаров по пластиковым трубкам с внутренним диаметром 0,3–1,0 мм перистальтическими насосами с постоянной скоростью непрерывно подаются растворы носителя и реагента. В поток носителя периодически с помощью дозирующего крана вводятся фиксированные микрообъемы образца.

После ввода каждая микропроба, образующая жидкий сегмент в потоке носителя, движется вдоль трубопровода по направлению к детектору. В некоторой точке трубопровода поток носителя смешивается с реагентом в реакционной спирали, где компоненты вступают в химическое взаимодействие. Объединенный поток проходит через ячейку детектора, который непрерывно регистрирует некоторый физический параметр (светопоглощение, электродный потенциал или другое свойство). При прохождении зоны образца через детектор регистрируется переходный сигнал в форме пика.

Приборы, предназначенные для выполнения ПИА, в потоке в автоматическом режиме осуществляют многие операции: отбор пробы, введение ее в движущийся поток носителя (реагента), физическую и химическую подготовку пробы, детектирование сигнала, запись результатов измерений, математическую обработку данных.

На рис. 17 приведена блок-схема простейшего проточно-инжекционного анализатора.

Анализатор состоит из следующих узлов: насосной системы, обеспечивающей ввод реагентов в анализатор и создание потока растворов носителя и реагента; устройства отбора и ввода пробы (рис. 18) в движущийся с фиксированной скоростью поток носителя; аналитического модуля, основу которого составляет совокупность индивидуальных микротрубопроводов, соединненых между собой и с дозатором; детектора с проточной ячейкой;

блока управления, обработки данных и выдачи результатов.

Профиль пика ПИА характеризуется такими же параметрами, как пики разделенных веществ на хроматограмме. Как правило, время движения образца составляет 2–60 с. Химические реакции в таких условиях могут протекать не до конца. Кроме того, при движении сегмента микропробы в потоке происходят процессы диффузии. Таким образом, аналитический сигнал измеряется детектором в неравновесных условиях, когда ни физические процессы разбавления анализируемой пробы носителя, ни химические реакции не завершены. Однако строгий контроль времени пребывания пробы в системе и степени ее разбавления в потоке за счет подбора скорости потока позволяют добиваться хорошо воспроизводимых результатов. Концентрации анализируемого вещества определяют, сравнивая интенсивность (высоту) пика образца с пиками, полученными в тех же условиях для стандартных растворов (метод градуировочного графика).

1 - насосная система, обеспечивающая ввод растворов в анализатор и создание регулярного потока анализируемого раствора с фиксированной скоростью; 2 - ручной дозирующий кран, обеспечивающий отбор пробы и ввод ее в движущийся поток носителя; 3 - фотометрический детектор с проточной цилиндрической кюветой; 4-самописец I - заполнение калибровочной петли; II - транспорт реакционной зоны.

В целом, ПИА базируется на следующих основополагающих принципах:

– ввод микропробы (образца) в ламинарный поток носителя;

– стабильное движение зоны образца в системе, сопровождающееся протеканием различных физико-химических процессов (смешивание, химическое взаимодействие, диализ, экстракция и т.д.);

– строгий контроль дисперсии (размывания и разбавления) введенного образца в процессе транспорта его через систему, определяемой геометрическими и гидродинамическими параметрами;

– постоянство времени пребывания образца в системе;

– непрерывное детектирование некоторого физического свойства в неравновесных условиях.

Эти принципы в той или иной степени реализуются в жидкостной хроматографии.

Однако главная особенность ПИА, отличающая его от других методов анализа в потоке, состоит в том, что для него существенна дисперсия образца и образование контролируемого градиента концентрации образца в ламинарном потоке носителя (реагента). При этом детектирование аналитического сигнала осуществляется в тот момент, когда ни диффузионные процессы, ни химические реакции не завершены. Таким образом, ПИА это кинетический метод как в «физическом», так и в «химическом» смысле. При этом простота принципов ПИА ни в какой степени не исключает сложностей физико-химических процессов, имеющих место в проточно-инжекционной системе.

На аналитический сигнал ПИА влияет, как правило, кинетика двух процессов: физической дисперсии (размывания) зоны образца в потоке носителя (реагента) и химического процесса образования детектируемых частиц. В связи с этим теория ПИА основана на сочетании гидродинамической теории смешивания жидкостей в непрерывно движущихся потоках и теории неравновесной химической кинетики.

Существование границы раздела образец – носитель в потоке приводит к частичному размыванию (разбавлению) зоны образца по мере ее продвижения через проточноинжекционную систему. Это явление получило название физической дисперсии образца.

Степень дисперсии вдоль зоны образца неодинакова. В двух крайних частях зоны она является результатом молекулярной диффузии и конвекции, а в центральной части, где отсутствует граница раздела носитель/образец, происходит только конвекция. Природа и степень дисперсии определяются, таким образом, физическими параметрами системы (объемом пробы, скоростью потока, длиной и диаметром трубопровода, конструкцией дозатора, детектора и потокораспределительного устройства), а также физикохимическими свойствами протекающего в системе раствора (вязкости, коэффициента молекулярной диффузии и т.д.). Варьируя эти параметры можно изменять степень дисперсии. Например, процессы конвекции доминируют при высоких скоростях потока и малой длине трубопровода, а диффузия, наоборот, преобладает в случае более длинных трубопроводов и при низких скоростях. Степень дисперсии возрастает с увеличением внутреннего диаметра трубопровода.

Основное преимущество ПИА связано с тем, что этот метод является наиболее простым и эффективным способом автоматизации массового анализа жидких образцов.

Обычный вариант химического анализа с использованием различных физико-химических методов анализа предусматривает длительные и трудоемкие операции отбора пробы, приготовления растворов определяемого вещества, реагента, их смешения в определенных пропорциях, выдерживания реакционной смеси в течение определенного времени и, наконец, измерения аналитического сигнала потенциометрическим, оптическим или иным методом. Естественно, что продолжительность анализа в таком случае составляет несколько десятков минут и даже часов. Проточно-инжекционный анализ уже не имеет ограничений, связанных с необходимостью добиваться завершенности химической реакции. Поэтому производительность определений в ПИА достигает 500 проб в час в тех случаях, когда используются быстрые химические реакции. В свою очередь, это означает резкое удешевление стоимости единичного анализа.

Основные области приложения ПИА в анализе ЛВ связаны с контролем качества различных фармацевтических продуктов (субстанций, ЛФ); определением токсичных компонентов реакционных смесей в процессе синтеза ЛВ; исследованием процессов, протекающих при хранении готовых ЛФ, и установлением их безопасности; с оценкой процессов распадаемости ЛФ и определением биодоступности лекарств; проведением мониторинга физиологически активных веществ в биологических средах.

Особенность проточно-инжекционных (ПИ) определений ЛВ связана с тем, что их необходимо проводить в сложных по составу анализируемых матрицах при низких содержаниях определяемых веществ (например, до нескольких нанограммов на 1 мл при анализе биологических жидкостей). В связи с этим одной из проблем, ограничивающей применение ПИА в фармацевтическом анализе, является возможность избирательного и чувствительного детектирования определяемых соединений.

Избирательность ПИ определений ЛВ. Возможности расширения круга анализируемых соединений. Большинство ЛВ по своей структуре является органическими соединениями различной химической природы. Специфика значительной части ЛВ и их метаболитов, связанная с высокой полярностью, слабо выраженными хромофорными, электрофорными или флуорофорными свойствами, зачастую накладывает ограничения на возможности избирательного детектирования при проведении ПИ определений. Кроме того, измерение аналитического сигнала в неравновесных условиях, когда физические и химические процессы в реакторе не завершены, вызывает необходимость быстрого изменения аналитических свойств ЛВ (использования «быстрых» реакций) за время движения определяемого соединения к детектору.

Для повышения избирательности и чувствительности ПИ определений, расширения возможностей метода используются различные приемы. Дериватизация (получение производных определяемых веществ) пока является приоритетным подходом улучшения аналитических свойств определяемых ЛВ в системе ПИА. Целью ее проведения в ПИА ЛВ служит получение новых соединений, обладающих улучшенными детекционными характеристиками по сравнению с исходными ЛВ. Для получения производных применяют химические, фотохимические и ферментативные реакции. При этом реакции могут происходить во время движения реакционной зоны до детектора или непосредственно в детекторе во время измерения. Во втором случае дериватизацию определяемых ЛВ в целях достижения более высоких аналитических характеристик можно рассматривать как частный случай более общего подхода в химической модификации гетерогенных и гомогенных составляющих аналитической системы при создании высокоселективных способов детектирования в потоке. Модификация поверхности электродов различными химическими реагентами или ферментами приводит к созданию высокоспецифичных и чувствительных сенсоров, широко применяющихся для детектирования в ПИА. Этот прием позволяет в итоге повысить как избирательность, так и чувствительность аналитического отклика.

При дериватизации также достигается улучшение экстракционных характеристик определяемых соединений, повышается устойчивость их в процессе анализа, упрощается и облегчается процесс пробоподготовки, уменьшается предел обнаружения ЛВ.

Важным способом расширения круга ЛВ, которые можно избирательно определять в системе ПИА, служит применение различных систем детектирования. Для этого используют оптические, электрохимические и другие детекторы. Выбор системы детектирования во многом определяется типом химической реакции, используемой для дериватизации ЛВ, и физико-химическими свойствами образующихся производных. Особенно перспективно применение в системе ПИА комбинированных систем детектирования, когда последовательно регистрируется аналитический отклик определяемого вещества с использованием различающихся по физическому принципу устройств.

Другим важным фактором расширения возможностей ПИА стали традиционные аналитические технологии разделения и концентрирования определяемых соединений, такие как экстракция и диализ (микродиализ).

Химические реакции. Дериватизация является основным химическим приемом расширения аналитических возможностей ПИА ЛВ. Для этой цели чаще применяются химические реакции ЛВ, в ходе которых образуются соединения с новым составом, структурой и отличными от исходного вещества физико-химическими свойствами. Широко используются различные реакции с участием ЛВ: окислительно-восстановительные, комплексообразования, осаждения, образования ионных пар и аддуктов и др.

Приведенные в табл. 11 данные по использованию различных типов реагентов для дериватизации свидетельствуют о большом разнообразии применяемых реакций получения производных ЛВ и методов их детектирования: спектрофотометрическое детектирование (СФД), электрохимическое детектирование (ЭХД), флуориметрическое детектирование (ФЛД) в ПИА.

Таблица 11. Основные типы химических реакций и реагентов, используемых в ПИА лекарственных веществ Образование азосоединений Конденсация с карбомер-каптоэтанол, п- Сульфаниламиды, амины, ниями Нуклеофильное 2,1,3-оксадиазола, замещение 1-фтор-2,4производные фенолов, кате- ЭХД Использование приема дериватизации определяемых веществ демонстрирует высокую эффективность этого подхода в повышении чувствительности методов детектирования ЛВ. При проведении этих реакций, однако, необходимо учитывать ряд специфических особенностей, связанных со сложностью протекания органических реакций. Реакции, используемые для получения производных ЛВ, во многих случаях протекают с невысокими скоростями, характеризуются сложным механизмом, зависимостью от состава среды, pH и других факторов. Часто незначительные изменения условий проведения реакций могут вызвать радикальные изменения результатов определения.

При выборе реакции для получения производных определяемых соединений нужно учитывать малую специфичность многих из них, что может приводить к образованию продуктов с однотипными аналитическими свойствами как для интересующих ЛВ, так и для других компонентов смеси. Примером такой реакции может служить определение в системе ПИА сульфаниламидов в виде диазотированных производных с N-(1-нафтил)этилендиамином, в которой участвуют, кроме аминов, фенолы и другие соединения, содержащие активную метиленовую группу:

Все эти особенности реакций получения производных ЛВ, тем не менее, не устраняют возможности получения удовлетворительных по метрологическим характеристикам и чувствительности результатов определения при правильном выборе реагента, соблюдении условий проведения реакции дериватизации, строгом контроле времени пребывания пробы в системе ПИА и степени ее разбавления в потоке.

Оптическое детектирование в ПИА ЛВ. Наиболее распространенным методом детектирования при ПИ определении ЛВ благодаря универсальности и невысокой стоимости является спектрофотометрия. Использование диодно-матричных детекторов приводит к повышению избирательности определений, позволяя получать полную спектральную информацию, в том числе о чистоте пика. Повышенная избирательность отклика СФД достигается при проведении в проточной системе селективных (специфических) реакций, протекающих с образованием окрашенных соединений. Это упрощает определения в матрицах сложного состава, особенно биологических. При этом в большинстве случаев необходимо создавать условия для количественного завершения реакций дериватизации ЛВ в системе ПИА.

Перспективным методом детектирования производных ЛВ в ПИА является спектрофлуориметрия, позволяющая значительно понизить пределы обнаружения и повысить избирательность детектирования веществ.

ПИА открывает новые возможности для использования кинетических методов анализа ЛВ, поскольку каталитическая реакция протекает при постоянных временных и геометрических характеристиках. При этом снижается влияние скорости некаталитической реакции и повышается чувствительность определений.

Перспективным способом расширения возможностей ПИ определения ЛВ служит фотохимическая дериватизация веществ. Фотодериватизация, вызывая появление разнообразных продуктов фотохимических превращений определяемого вещества, приводит к появлению или резкому возрастанию интенсивности регистрируемого сигнала. Предел обнаружения производных ЛВ можно улучшить при использовании химической реакции для возбуждения флуоресценции вместо УФ-облучения.

Электрохимическое детектирование. Использование электрохимических детекторов при ПИ определении ЛВ на порядок чувствительнее спектрофотометрического варианта детектирования. В ПИА ЛВ более широкое распространение получили методы амперометриии с химически модифицированными электродами, потенциометрии с ионселективными электродами и кондуктометрии. Возможность использования ЭХД в ПИА ЛВ основана на детектировании ЛВ, проявляющих электрохимические свойства (нитросоединения, амины, фенолы, гидразины и др.).

Методы разделения и концентрирования в ПИА ЛВ. Важнейшим достоинством ПИА является возможность проведения автоматизированных операций пробоподготовки в процессе непрерывного движения зоны образца к детектору. Наиболее распространенным методом разделения в ПИА ЛВ является экстракция. Описаны системы однократной экстракции ЛВ в системе ПИА без разделения фаз перед детектированием. Образцы при этом вводят в поток экстрагента, непрерывно прокачиваемого через экстракционную спираль в детектор.

Для устранения мешающего влияния веществ используют сочетание ПИА с диализными системами, особенно при анализе систем in vivo.

Следует отметить, что в экспертизе эффективности и безопасности ЛС проточные методы анализа играют существенную роль. В международных стандартах большое значение придается развитию высокопроизводительных и чувствительных аналитических методов для обеспечения контроля безопасности и эффективности лекарств не только в процессе их разработки и промышленного выпуска, но и в процессе распространения на фармацевтическом рынке. Поэтому ВОЗ рекомендует продолжать разработку достаточно простых альтернативных методов тестирования ЛВ с целью включения их в Международную фармакопею. Необходимо отметить, что в ряде стран схема проведения испытаний ЛС в значительной степени автоматизирована, в частности, с помощью систем проточно-инжекционного анализа.

Таким образом, можно констатировать, что ПИА уверенно занимает место в одной из наиболее сложных по решаемым задачам областей фармацевтической химии – фармацевтическом и биофармацевтическом анализе. Это связано с возможностью получения удовлетворительных по селективности, чувствительности, производительности и метрологическим характеристикам результатов определения органических веществ в сложных по составу матрицах при правильном выборе используемой реакции, пробоподготовки в неравновесных условиях, строгом контроле времени пребывания пробы и ее разбавления в системе ПИА, использовании современных систем детектирования. Это предполагает возможность того, что ПИА может стать стандартной, регламентируемой процедурой при определениях многих ЛВ в ходе оценки качества продукции фармацевтического рынка.

8. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ

Разнообразие ЛФ обусловливает необходимость использования в фармацевтической практике их определенной классификации. Чаще используется классификация по агрегатному состоянию и консистенции, которая включает следующие группы ЛФ:

– твердые (порошки, таблетки, драже, гранулы, брикеты, капсулы);

– жидкие (истинные и коллоидные растворы, суспензии, эмульсии, капли, линименты, настои, настойки, отвары, экстракты, слизи, микстуры);

– мягкие (мази, суппозитории, пилюли, желатиновые капсулы, пластыри, пленки, липосомы);

– газообразные (аэрозоли, газы).

Одно и то же ЛС может применяться в разных формах.

Согласно классификации по числу содержащихся ЛВ, все ЛФ делятся на одно-, двухи так далее, т.е. на многокомпонентные лекарственные смеси.

Ниже представлена характеристика основных групп различных ЛФ:

таблетки – дозированная ЛФ, получаемая путем прессования или формирования ЛС, лекарственных смесей и вспомогательных веществ;

драже – дозированная ЛФ округлой формы, получаемая путем многократного наслаивания ЛС и вспомогательных веществ в гранулы;

гранулы – однородные частицы (крупинки, зернышки) ЛС округлой, цилиндрической или неправильной формы размером 0,2–0,3 мм.;

порошки – ЛФ, обладающие сыпучестью; различают порошки простые (однокомпонентные) и сложные (из двух и более компонентов), разделенные на отдельные дозы и неразделенные;

сборы – смесь нескольких видов изрезанного, истолченного в крупный порошок или цельного лекарственного сырья растений – иногда с добавлением других ЛС;

капсулы – дозированные порошкообразные, гранулированные, иногда жидкие ЛС, заключенные в оболочку из желатина, крахмала, иного биополимера;

спансулы – капсулы, в которых содержимым является определенное количество гранул или микрокапсул;

карандаши лекарственные (медицинские) – цилиндрические палочки толщиной 4– мм и длиной до 10 см с заостренным или закругленным концом;

пленки лекарственные – ЛФ в виде полимерной пленки;

мази – ЛФ мягкой консистенции для наружного применения; при содержании в мази порошкообразного вещества свыше 25% мази называют пастами;

пластыри – ЛФ для наружного применения в виде пластичной массы, обладающей способностью после размягчения при температуре тела прилипать к коже; пластыри наносятся на плоскую поверхность тела;

суппозитории (свечи) – твердые при комнатной температуре и расплавляющиеся при температуре тела дозированные ЛФ, предназначенные для введения в полости тела (ректальные, вагинальные свечи); суппозитории могут иметь форму шарика, конуса, цилиндра, сигары и т.д.

пилюли – дозированная ЛФ в виде шарика массой 0,1–0,5 г, приготовленная из однородной пластической массы, содержащей ЛС и вспомогательные вещества; пилюля массой более 0,5 г называется болюсом.

растворы – ЛФ, полученные путем растворения одного или нескольких ЛС;

суспензии (взвеси) – системы, в которых твердое вещество взвешено в жидком, размер частиц колеблется от 0,1 до 10 мкм;

эмульсии – ЛФ, образованные нерастворимыми друг в друге жидкостями;

настои и отвары – водяные вытяжки из лекарственного растительного сырья или водные растворы экстрактов;

слизи – ЛФ высокой вязкости, а также приготовленные с применением крахмала из водной вытяжки растительного сырья;

линименты – густые жидкости или студнеобразные массы;

пластыри жидкие – при нанесении на кожу оставляют эластичную пленку;

сиропы лекарственные сахара;

настойки – спиртовые, водно-спиртовые или спирто-эфирные прозрачные извлечения из лекарственного растительного сырья, полученные без нагревания и удаления экстрактов;

экстракты – концентрированные извлечения из лекарственного растительного сырья;

различают жидкие, густые, сухие и другие виды экстрактов.

Анализу ЛФ в ГФ X и XI уделяется достаточно много внимания: например, из 707 частных ФС 250 посвящены стандартам качества ЛФ (инъекционные растворы, таблетки, порошки, мази, драже, присыпки). Подавляющее большинство объектов испытаний являются однокомпонентными ЛФ.

Нормативные требования к качеству ЛФ учитывают тот факт, что они производятся преимущественно предприятиями химико-фармацевтической промышленности. Поэтому их называют готовые ЛС или ЛФ в отличие от экстемпоральных (от лат. ex tempore - в нужный момент, незамедлительно), которые изготовляют в аптеках по рецептам врачей.

Качество всех ЛФ контролируют в соответствии с требованиями ГФ и другой НД. Большинство разделов фармакопейных статей о качестве ЛФ по структуре и содержанию мало отличается от соответствующих разделов статей на субстанции. Вместе с тем для стандартов качества ЛФ существуют следующие особенности:

– состав ЛФ приводят в виде перечня исходных компонентов с указанием НД, соответствующей каждому из них;

– индивидуальное содержание компонента указывают в расчете на 100 г или 100 мл ЛФ, а в случае компактных ЛФ – на 1 таблетку, 1 драже и т.п.;

– сведения о внешнем виде (цвет, запах, вкус – если лекарственный препарат не принадлежит к списку А) и физико-химических свойствах указывают в разделе «Описание»;

– описание испытаний на подлинность приводят в соответствующем разделе ФС, причем в случае ЛФ сложного состава испытаниям подвергают каждый компонент;

– способ количественного определения каждого ЛВ описывают в разделе «Количественное определение» и указывают его содержание (%) или активность (ЕД) в расчете на 1 таблетку, 1 мл, 1 капсулу и т.п.;

– при анализе таблеток устанавливают среднюю массу таблетки и допустимые отклонения от нее.

Таким образом, основными этапами оценки качества ЛФ являются испытания на подлинность и количественное определение каждого ЛВ. Подлинность однокомпонентных ЛФ подтверждают такими же химическими реакциями, как и для соответствующего индивидуального ЛВ.

Испытаниям на доброкачественность, согласно ГФ, подвергают только инъекционные растворы, оценивая их прозрачность, окраску, рН, допустимые и недопустимые примеси.

Оценка качества одно- и многокомпонентных ЛФ может осложняться взаимодействиями ЛВ с растворителем, наполнителем, стабилизатором, консервантом и другими вспомогательными веществами. Поэтому при анализе твердых ЛФ наполнитель следует отделять от ЛВ.

При анализе многокомпонентных ЛФ способы определения индивидуальных ЛВ в большинстве случаев не дают положительных результатов. Испытания необходимо проводить с соблюдением следующих правил:

– выбирать условия, позволяющие анализировать одно ЛВ в присутствии других;

– проводить по возможности предварительное разделение ЛВ, а также отделение их от вспомогательных веществ (например, экстракцией, хроматографическими методами и др.);

– учитывать те индивидуальные физико-химические свойства компонентов, которые могут стать причиной нежелательных взаимодействий при анализе ЛФ (адсорбции, гидролиза и т.д.);

– использовать модельные смеси для отработки оптимальных методик разделения компонентов и их анализа.

К сожалению, очень редко удается найти универсальный метод, позволяющий оценить соответствие фармакопейным стандартам всех активных компонентов ЛФ. Поэтому испытания проводят, сочетая несколько методов с учетом особенностей физико-химических свойств компонентов (растворимости, окислительно-восстановительных, кислотно-основных и др.).

Рассмотрим основные общие особенности выполнения испытаний различных видов ЛФ.

Таблетки подвергают испытанию на распадаемость. В основном таблетки должны распадаться в течение 15 мин, а покрытые оболочкой - не более 30 мин. Кишечнорастворимые таблетки не должны распадаться в течение 1 ч в растворе соляной кислоты, но должны в течение того же времени распадаться в растворе натрия гидрокарбоната.

Прочность таблеток на истирание должна быть не менее 75%. ЛВ, содержащееся в таблетке, должно растворяться в воде за 45 мин не менее чем на 75%. Среднюю массу определяют взвешиванием 20 таблеток с точностью до 0,001 г. Отклонения от средней массы допускаются ±7,5% для таблеток массой 0,1–0,3 г и ±5% для таблеток массой 0,5 г и более.

Масса таблеток, полученных методом наращивания, не должна отличаться от средней массы более чем на ±15%. Определение содержания ЛВ в таблетках выполняют с помощью методик, приведенных в частных статьях. Отклонения должны составлять: ±15% при дозе ЛВ до 0,001 г; ±10% – от 0,001 до 0,01 г; ±7,5% – от 0,01 до 0,1 г; ±5% – от 0,1 г и более. Испытания однородности дозирования проводят для таблеток без оболочки с содержанием 0,05 г и менее ЛВ, а для таблеток, покрытых оболочкой, – 0,01 г и менее. Отклонения в дозировке ЛВ не должны превышать ±15%.

Гранулы. Размер гранул определяют с помощью ситового анализа. Размер гранул должен быть 0,2–3 мм, а число более мелких и более крупных гранул не должно превышать 5%. Испытание распадаемости гранул проводят так же, как и для таблеток. Время распадаемости не должно превышать 15 мин.

Капсулы. Контролируют среднюю массу капсул. Отклонение от массы каждой капсулы не должно превышать ±10%. Подобно тому, как это делают в отношении таблеток, контролируют распадаемость и растворимость капсул, а также определяют однородность дозирования для капсул, содержащих 0,05 г и менее ЛВ.

Порошки. Устанавливают отклонения, допустимые в массе дозированных порошков, они могут быть ±15% при массе порошка до 0,10 г; ±10% – от 0,11 до 0,30 г; ±5% – от 0, до 1,00; ±3% – свыше 1,00. Способы идентификации и количественного определения однокомпонентных порошков не отличаются от анализа входящих в их состав ЛВ, если в порошке отсутствуют вспомогательные вещества. При анализе сложных порошков следует учитывать возможное влияние других компонентов и вспомогательных веществ.

Суппозитории. Визуально определяют однородность на продольном срезе суппозитория. Средняя масса устанавливается взвешиванием с точностью до 0,01 г, отклонение не должно превышать ±5%. Суппозитории, изготовленные на липофильных основах, контролируются по температуре плавления, которая не должна превышать 37° С. Если эту температуру установить невозможно, то определяют время полной деформации, которое должно быть не более 15 мин. Для суппозиториев, изготовленных на гидрофильных основах, включен показатель «растворение». Определяют при 37±1°С время растворения, которое не должно превышать 1 ч.

В настойках определяют содержание спирта или плотность. Содержание действующих веществ устанавливают с помощью методик, указанных в частных статьях. Кроме того, определяют сухой остаток, полученный после выпаривания в бюксе досуха 5 мл настойки и высушивания его в течение 2 ч при 102,5±2,5°С. В таком же объеме настойки после сжигания и прокаливания ее смеси с 1 мл концентрированной серной кислоты определяют содержание тяжелых металлов.

В экстрактах, как и в настойках, определяют плотность или содержание спирта, действующих веществ, тяжелых металлов. Устанавливают также массу сухого остатка, а в густых и сухих экстрактах - содержание влаги высушиванием в сушильном шкафу при 102,5 ± 2,5° С.

При проверке качества аэрозолей проводят измерение давления внутри баллона с помощью манометра при комнатной температуре. Это испытание выполняют, если пропеллентом служит сжатый газ. Производят проверку упаковки на герметичность. Определяют в дозированных аэрозолях среднюю массу препарата в одной дозе, отклонения в которой допускаются не более ±20%. Устанавливают процент выхода содержимого упаковки путем удаления его из баллона с последующим взвешиванием.

Мази. Общим испытанием является метод определения размера частиц ЛВ в мазях микроскопическим методом.

Капли глазные. Основными для этой ЛФ являются испытания на стерильность и на наличие механических включений.

Инъекционные лекарственные формы вводятся в организм в ткани и жидкости, т.е.

минуя естественные защитные барьеры. Вот почему к ним предъявляется ряд дополнительных требований по сравнению с лекарствами, применяемыми наружно или перорально. Эти требования находятся также в зависимости от вида инъекционной ЛФ: водные растворы, масляные растворы, суспензии, эмульсии, стерильные порошки или таблетки, растворяемые перед введением. Особого контроля требуют инъекционные растворы, вводимые внутривенно в больших количествах.

Во всех фармакопеях мира регламентируются такие характеристики, как внешний вид, в том числе окраска и прозрачность инъекционных растворов, отсутствие механических примесей, апирогенность, стерильность, объем раствора или количество препарата, содержание действующего вещества. Иногда контролю подвергаются номенклатура, количество вспомогательных веществ, в том числе консервантов, рН и изотоничность растворов, упаковка, маркировка и т.д.

Инъекционные суспензии проверяются на гомогенность. Сущность испытания состоит в том, что после встряхивания в течение определенного времени они должны оставаться гомогенными. Это косвенно подтверждает отсутствие крупных частиц. Более совершенным является акустический метод контроля размера частиц суспензий и эмульсий, основанный на измерении коэффициента поглощения ультразвука.

Всеми фармакопеями нормируется объем наполнения ампул раствором. Этим достигается правильность дозировки ЛВ. В некоторых фармакопеях требуется строгое соблюдение объема, указанного на этикетке, в других указывается верхний предел, в третьих – верхний и нижний пределы содержания. В соответствии с требованиями ГФ XI объем инъекционных растворов не должен быть меньше номинального после отбора из сосуда шприцем, вытеснения воздуха и заполнения иглы, для сосуда вместимостью 50 мл и более – после выливания в калиброванный цилиндр при комнатной температуре.

Для сухих инъекционных ЛВ также регламентируется точность дозирования. Нормы допустимых отклонений обычно колеблются в пределах ±3–5%. По ГФ XI в стерильных сухих ЛФ определяют среднюю массу, взвешивая с точностью до 0,001 г. Отклонения содержимого одного сосуда не должно превышать ±15% (от средней массы). При массе содержимого сосуда 0,1 г и менее отклонение допустимо ±10%, при массе 0,3–0,1 г – ±7,5%, а при 0,3 г и более – ±5%. Сухие стерильные ЛФ для инъекций и суспензии при массе содержимого сосуда 0,05 г и менее подвергают испытанию на однородность дозирования.

Она не должна отклоняться от номинального количества более чем на ±15%.

Помимо нормирования ЛВ в инъекционных ЛФ большинство фармакопей регламентируют содержащиеся в них вспомогательные вещества, обеспечивающие их стабильность и консервирование. Они должны быть безвредными для организма человека и не вступать в химическое взаимодействие с действующим веществом. В ГФ XI уточнены виды вспомогательных веществ, а для некоторых из них (фенол, крезол, сульфиты, хлорбутанол) предусмотрены допустимые количества (от 0,2 до 0,5%).

Во многих фармакопеях отмечается необходимость изотоничности инъекционных растворов. В гипотонические растворы необходимо вводить для повышения осмотического давления натрия хлорид, глюкозу или некоторые другие вещества. В ГФ XI также введено требование об изогидричности и изотоничности отдельных инъекционных растворов. Предусмотрено определение прозрачности по сравнению с водой для инъекций или соответствующим растворителем. Окраску устанавливают, сравнивая с эталонами цветности.

По-разному указываются в фармакопеях требования к значению рН инъекционных растворов. Обычно отмечается, что рН должен быть близким к нейтральному, иметь нижнее значение рН 5 или находиться в пределах от 3 до 8.

На каждой ампуле (сосуде) указывают название ЛС, его содержание (%) или активность (ЕД), объем или массу и номер серии. Хранят инъекционные ЛФ в упаковке, обеспечивающей их стабильность, в течение указанного в ФС срока годности.

Испытания на отсутствие в инъекционных растворах механических примесей выполняют визуально или с помощью приборов, основанных на фотоэлектрическом или кондуктометрическом принципах регистрации частиц.

Во всех фармакопеях мира важное место отведено анализу ЛФ. Около 30% частных фармакопейных статей содержат требования к качеству инъекционных растворов, таблеток, драже, мазей, присыпок. Подавляющее большинство из них включает одно ЛВ. Систематизация сведений об испытаниях подлинности, чистоты и количественном определении однокомпонентных ЛФ позволяет сделать заключение об общих принципах оценки их качества.

Испытания на подлинность выполняют, как правило, с помощью химических реакций, указанных в фармакопейных статьях на индивидуальные вещества, входящие в состав данной ЛФ. Некоторые ЛВ предварительно извлекают из ЛФ органическими растворителями и выполняют испытания.

ЛВ, содержащиеся в растворах для инъекций, как правило, испытывают на подлинность так же, как соответствующие вещества. Иногда раствор выпаривают досуха, а затем с остатком выполняют одно или несколько испытаний на подлинность. Растворы солей органических оснований, как правило, предварительно нейтрализуют щелочами, а затем основания извлекают органическими растворителями.

Таблетки и драже перед испытанием на подлинность растирают в порошок, взбалтывают с водой или другим растворителем (этанолом, эфиром, хлорофосом, ацетоном, бензолом, раствором соляной или уксусной кислоты, раствором аммиака или гидроксида натрия) и фильтруют. Затем с фильтратом выполняют испытания на подлинность, используя реакции, рекомендуемые ГФ ХI для данного ЛВ. При плохой растворимости процесс экстракции выполняют при нагревании до определенной температуры. Иногда реактив добавляют непосредственно к порошку растертых таблеток или извлекают препарат и выполняют испытания с остатком (после удаления органического экстрагента).

Из мазей ЛВ предварительно экстрагируют эфиром или другим растворителем. Для этого мазь обрабатывают разведенной серной, соляной или уксусной кислотой при перемешивании и нагревании на водяной бане, затем охлаждают и фильтруют. Фильтрат испытывают с помощью химических реакций на соответствующие ионы или функциональные группы.

Масляные растворы перед выполнением испытаний растворяют в бензоле, петролейном эфире, хлороформе или ЛВ извлекают смесью растворителей. Подлинность извлеченного ЛВ подтверждают либо по температуре плавления (самого препарата или его производного), либо цветными или осадочными реакциями, либо с помощью тонкослойной хроматографии.

Для испытания подлинности ГФ ХI рекомендует использовать спектрофотометрию в УФ-области. Из порошка растертых таблеток или драже извлекают ЛВ (водой или другим растворителем). Затем измеряют УФ-спектр и устанавливают наличие максимума светопоглощения при определенной длине волны или оптическую плотность в максимуме светопоглощения либо рассчитывают значения отношений оптических плотностей при различных максимумах. Более объективна идентификация ЛВ путем сравнения с УФспектрами стандартных образцов.

Количественный анализ однокомпонентных ЛФ выполняют в несколько этапов.

Отбор пробы и взятие навески. При анализе твердых (таблетки, драже, гранулы) и жидких (растворы, сиропы) ЛФ обычно руководствуются общими правилами отбора проб.

Вначале отбирается необходимое количество таблеток (драже) или жидкости. Оно должно быть достаточно для того, чтобы результаты анализа были точными для всей ЛФ. Затем после перемешивания или растирания отвешивают навеску. Процесс растирания необходим для получения гомогенной массы, в которой ЛВ было бы равномерно распределено во всем объеме пробы. Не подвергают растиранию только таблетки, покрытые оболочкой, и драже. ЛВ в таких таблетках и драже распределено неравномерно, и колебания в массе отдельных таблеток будут значительно влиять на результаты определения. Количественный анализ таких ЛФ проводят из определенного числа таблеток.

Подготовка ЛФ к анализу. На этом этапе проводят растворение (иногда с нагреванием). Выбор растворителя осуществляют с учетом растворимости ЛВ и других компонентов ЛФ, а также используемого метода количественного определения. Так, димедрол в таблетках количественно определяют методом нейтрализации в неводной среде, поэтому в качестве растворителя используют безводную уксусную кислоту. Целесообразно использование смешанных растворителей. При определении фтивазида в таблетках в качестве растворителей применяют безводную уксусную кислоту и хлороформ, а при определении дегидрохолевой кислоты – этанол и воду.

Для растворения жидких ЛФ чаще всего применяют воду, для растворения масляных растворов – этиловый и метиловый спирты, бензол, петролейный эфир.

Извлечение ЛВ из ЛФ осуществляют для более правильной и точной оценки его содержания в ЛФ. Данный этап является неизбежным, когда в ЛФ присутствуют ингредиенты, мешающие количественному определению ЛВ. Поэтому необходимо либо выделять индивидуальное вещество, либо отделять мешающие компоненты. Для полного или частичного разделения компонентов ЛФ используют различные способы: фильтрование, центрифугирование, экстракцию, а также экстракцию в сочетании с отгонкой. Наиболее часто для отделения ЛВ применяют фильтрование. К экстракционным методам можно отнести извлечение ЛВ или продуктов его превращения (органического основания, комплекса или ионного ассоциата). Для разделения используют также экстракцию в сочетании с планарной хроматографией.

Создание условий, необходимых для выполнения определения. После проведения предыдущих операций возможно определение ЛВ с помощью титриметрических или физикохимических методов. Однако чаще всего необходимо создание специальных условий. Они диктуются прежде всего методом, с помощью которого проводят количественную оценку препарата в данной ЛФ. Для комплексонометрии – это создание необходимого рН среды;

для метода нейтрализации в неводных средах – добавление ацетата ртути (II) при определении галогеноводородных солей органических оснований; при использовании броматометрии или нитритометрии – добавление в реакционную смесь бромида калия и создание кислой среды и т.д. Иногда необходимо извлечение продукта взаимодействия определяемого вещества с титрантом или предупреждение процесса его гидролиза. Добавление реактивов необходимо и при проведении фотоколориметрического определения препаратов в ЛФ.

Определение содержания ЛВ в ЛФ. Количественный анализ может быть осуществлен гравиметрическими, титриметрическими, физико-химическими и биологическими методами.

Разделение смеси с помощью экстракции основано на различии растворимости компонентов в воде и органических растворителях или на различии кислотно-основных свойств. По этому принципу ЛВ могут быть распределены на группы.

Неорганические вещества, как правило, нерастворимы в органических растворителях.

Оксиды металлов нерастворимы в воде, но растворимы в кислотах. Соли большинства неорганических кислот и щелочных, щелочноземельных и тяжелых металлов (за исключением сульфатов кальция и бария) хорошо растворимы в воде.

Органические кислоты алифатического ряда, оксикислоты, аминокислоты, как правило, растворимы в воде. Ароматические кислоты (бензойная, салициловая, ацетилсалициловая) практически нерастворимы (мало растворимы) в воде, но растворимы в органических растворителях.

Соли органических кислот (лимонной, уксусной, молочной, глюконовой, бензойной, салициловой), натриевые соли барбитуратов, сульфаниламидов растворимы в воде, но нерастворимы в таких органических растворителях, как хлороформ, эфир и др.

Все органические основания обычно растворимы в органических растворителях, некоторые из них растворимы в воде (гексаметилентетрамин, антипирин, амидопирин, цитизин). Большинство органических оснований и алкалоидов растворимы в растворах кислот (с образованием солей).

Соли органических оснований хорошо растворимы в воде, этаноле и, как правило, нерастворимы в таких органических растворителях, как эфир, хлороформ. Некоторые из солей органических оснований (тропацин, прозерин), в том числе алкалоидов (пахикарпина гидроиодид, кокаина гидрохлорид, папаверина гидрохлорид), растворимы и в воде, и в хлороформе.

Фенолы растворимы в щелочах с образованием фенолятов (феноксидов). Простые одноатомные и двухатомные фенолы легко растворимы в воде. Фенолы более сложной химической структуры, как правило, в воде нерастворимы. Некоторые азотсодержащие соединения (сульфаниламиды, алкилуреиды сульфокислот, циклические уреиды) растворимы в щелочах с образованием натриевых солей.

Органические вещества, не образующие солей с кислотами и щелочами (производные сложных эфиров, уретапы, ациклические уреиды, ацетаминопроизводные, терпены), обычно нерастворимы (трудно растворимы) в воде и растворимы в органических растворителях.

Имеются группы органических ЛВ, которые очень мало растворимы и в воде, и в органических растворителях (производные нитрофурана, 4-оксикумарина, урацила).

Различаются по растворимости природные биологически активные вещества. Препараты сердечных гликозидов малорастворимы или практически нерастворимы в воде и эфире. Практически нерастворимы в воде препараты стероидных гормонов. Большинство из них растворимо в растительных маслах и этаноле. Витамины по растворимости разделяются на две группы: водорастворимые и жирорастворимые. Антибиотики (левомицетин, феноксиметилпенициллин, гризеофульвин, эритромицин) малорастворимы или практически нерастворимы в воде. Натриевые и калиевые соли антибиотиков, а также их соли с соляной, серной кислотой в основном хорошо растворимы в воде, но нерастворимы (малорастворимы) в органических растворителях.

Используя различие в растворимости ЛВ, можно осуществить разделение компонентов лекарственных смесей следующими методами:

• При наличии в смеси веществ, хорошо растворимых в воде и практически в ней нерастворимых, разделение осуществляют обработкой смеси водой с последующим фильтрованием. На фильтре остаются нерастворимые в воде вещества. Так можно отделять от других ингредиентов растворимые в воде неорганические соли, соли органических кислот, соли азотсодержащих органических оснований.

• ЛВ, растворимые в органических растворителях, не смешивающихся с водой (хлороформ, эфир), можно отделять от веществ, нерастворимых в этих растворителях. Разделение выполняют путем экстракции хлороформом или эфиром. Так можно отделять ароматические кислоты и органические основания от солей неорганических и органических кислот, а также от солей органических оснований.

• Вещества, растворимые в органических растворителях, можно отделять от некоторых алифатических кислот и производных фенолов. Последние необходимо предварительно действием щелочей превратить в водорастворимые феноксиды (феноляты), затем растворителем, не смешивающимся с водой (хлороформом или эфиром), извлекают вещества, растворимые в этих растворителях.

• Для отделения веществ, растворимых в хлороформе или эфире, от органических оснований последние предварительно нейтрализуют кислотами. Полученные соли оснований остаются в водном растворе. Этот метод используют для отделения органических кислот от органических соединений.

• Соли органических оснований можно предварительно превратить в основания путем нейтрализации связанных кислот щелочами. Образующиеся органические основания затем экстрагируют хлороформом или эфиром.

Если, пользуясь описанными методами, удается количественно разделить компоненты смеси, то каждый из них затем определяют теми или иными аналитическими методами.

Следует учитывать, что ЛВ, малорастворимые в воде или в органическом растворителе, частично извлекаются вместе с отделяемым компонентом. Это нередко не дает возможности выполнить количественное разделение смеси. Необходимо также обращать внимание на отсутствие примеси воды в органическом растворителе. Разделение сухих ЛФ таким растворителем приводит к частичной экстракции веществ, растворимых в воде.

После извлечения ЛВ органическим растворителем последний обычно вначале удаляют, а затем проводят титрование. Органические основания (амидопирин) и основания алкалоидов (кодеин) извлекают из смесей хлороформом. Растворитель отгоняют, остаток растворяют в воде или в этаноле и титруют соляной кислотой, используя индикатор, соответствующий константе диссоциации основания. Барбитураты (барбитал, фенобарбитал) извлекают эфиром, затем эфир отгоняют. Остаток барбитурата растворяют в этаноле и титруют гидроксидом натрия. Натриевые соли барбитуратов вначале нейтрализуют кислотой, а затем экстрагируют эфиром и образовавшийся барбитурат титруют щелочью.

Количественное определение методом нейтрализации некоторых смесей, содержащих соли органических кислот и соли органических оснований, выполняют в присутствии органических растворителей (хлороформа, эфира). Хлороформ или эфир извлекает выделяющуюся органическую кислоту или органическое основание в процессе титрования.

Извлечение необходимо, так как они, проявляя кислые или основные свойства, могут повлиять на результаты титрования.

Физико-химические методы имеют ряд преимуществ перед титриметрическими методами анализа ЛФ. Наряду с высокой специфичностью, чувствительностью, быстротой выполнения анализа очень важна возможность выполнения анализа этими методами двух- и даже трехкомнонентных смесей без предварительного разделения с достаточной для фармацевтического анализа точностью. Наиболее универсальны в анализе ЛФ хроматографические методы.

Широк диапазон применения оптических методов в анализе многокомпонентных ЛФ.

Для определения компонентов фотоколориметрическим методом при подборе соответствующих цветных реакций определяют, как правило, содержание одного из ЛВ в сложных лекарственных смесях. Так, для количественной оценки парацетамола в смесях с анальгином, кофеином, салицилатами используют методику, основанную на гидролизе препарата и последующем диазотировании и азосочетании. Спектрофотометрический метод количественного анализа без предварительного разделения компонентов основан на аддитивности значений оптической плотности всех компонентов смеси при одной длине волны.

Спектрофотометрическое определение двух (и более) компонентных лекарственных смесей может быть осуществлено различными способами в зависимости от характера светопоглощения каждого компонента:

• ЛФ содержит два вещества, одно из которых имеет максимум светопоглощения, а другое не поглощает УФ-свет в данной области. Спектрофотометрический анализ выполняют, как и при анализе однокомпонентной ЛФ.

• Каждый из двух компонентов смеси имеет свой максимум светопоглощения, в котором второй компонент оптически прозрачен. Это наиболее оптимальный вариант, позволяющий без разделения определять концентрацию обоих компонентов, содержащихся в ЛФ. Каждый из компонентов анализируют в соответствующем максимуме светопоглощения.

• ЛФ включает два вещества, причем в максимуме поглощения одного из них имеет некоторое светопоглощение и второе вещество, а в максимуме поглощения второго вещества первое оптически прозрачно. ЛВ, в максимуме которого другой компонент не поглощает, определяют, как и в однокомпонентной ЛФ.

• Если двухкомпонентая лекарственная смесь содержит ЛВ, полосы поглощения которых налагаются друг на друга, то для количественного определения может быть использован расчетный метод, основанный на использовании закона аддитивности оптических плотностей.

9. СТАБИЛЬНОСТЬ И СРОКИ ХРАНЕНИЯ

ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

9.1. Критерии стабильности лекарственных средств Стабильность (устойчивость) ЛВ и его качество тесно связаны между собой. Исследование стабильности лекарств в зависимости от различных факторов, установление сроков хранения ЛС – одна из важнейших проблем, решением которой занимаются специалисты разных областей химии и фармации.

Критериями стабильности ЛС являются следующие характеристики, соответствие которым свидетельствует о необходимом уровне качества ЛС:

– сохранение содержания терапевтической дозы ЛВ в ЛФ в течение определенного срока;

– уменьшение количественного содержания ЛВ на 10% в течение 3–4 лет для готовых ЛС, а для экстемпоральных ЛС – в течение 3 месяцев; причем оно не должно сопровождаться появлением токсичных продуктов, изменением физико-химических свойств ЛВ и характера его фармакологического действия.

По истечении срока хранения препарат не может быть использован без переконтроля качества и соответствующего изменения установленного срока хранения. Существует определенная взаимосвязь между понятием «срок хранения», имеющим временной смысл, и понятием «стабильность», обусловливающим качество лекарства (его устойчивость).

Разложение ЛВ иногда можно установить по внешнему виду. Однако образование продуктов разложения не всегда сопровождается заметным снижением фармакологической активности. Это объясняется тем, что внешние изменения могут быть вызваны разложением незначительного количества ЛВ с образованием нетоксичных или индифферентных продуктов разложения. НД допускает определенное количество таких примесей в ЛВ. Если изменяется внешний вид ЛС вследствие появления продуктов частичного разложения нестабильного ЛВ, то НД допускает присутствие в определенных пределах таких примесей при условии отсутствия у них токсичности и их физиологической индифферентности. С другой стороны, в результате разложения ЛВ внешний вид ЛС может оставаться без заметных изменений, однако обнаруживаемые при физико-химическом исследовании примеси продуктов разложения способны оказывать токсическое действие или нежелательно влиять на фармакологическую активность ЛС. Такие примеси строго контролируются в соответствии с требованиями НД.

Стабильность – одна из важнейших характеристик ЛС. Химико-фармацевтическое предприятие должно гарантировать содержание терапевтической дозы лекарственного препарата в ЛФ в течение определенного срока.

При изучении проблемы стабильности как показателя качества ЛС физикохимические методы приобретают значение не только как способы контроля качества ЛС, но и как средства исследования механизмов химических процессов, происходящих в ЛС.

На основании результатов этих исследований разрабатываются способы ингибирования процессов, негативно влияющих на характеристики ЛС, а также методы пролонгирования действия активных субстанций ЛФ.

Решение этих задач возможно лишь с помощью методов анализа ЛВ в присутствии продуктов их разложения. Результаты исследований должны учитываться при обработке технологии получения ЛС и разработке НД. Немаловажное значение при этом имеет и экономическая сторона повышения стабильности ЛВ. Списание лекарств, пришедших в негодность вследствие ограниченных сроков хранения, приводит к большим убыткам.

Процессы, происходящие при хранении лекарств, могут привести к изменению их химического состава или физических свойств: образованию осадка, изменению окраски или агрегатного состояния. Эти процессы приводят к постепенной потере фармакологической активности или к образованию примесей, изменяющих направленность фармакологического действия.

Из физических факторов наибольшее влияние на стабильность лекарств оказывают температура, свет и влажность.

Особенно велика роль температурного режима на стабильность ЛВ. Так, при нагревании заметно увеличивается скорость химических реакций, что может стать причиной нестабильности ЛС. Если принять температурный коэффициент, равный 2, скорость реакции при нагревании реагирующих веществ от 20 до 100оС возрастает в 256 раз. Из этого вытекает необходимость установления оптимальных температурных условий для хранения тех или иных лекарственных препаратов.

Большинство ЛС, как правило, сохраняет качество при температуре от 6 до 25оС. Лекарственные растворы в ампулах, ферментные, гормональные лекарственные препараты (преднизолон, тиреоидин, инсулин и др.), некоторые мази (особенно отпускаемые в стеклянных банках) следует хранить в холодильнике (но не в морозильной камере). Рекомендуется хранить в холодильнике также и летучие вещества, в частности эфирные масла (анисовое, эвкалиптовое, ментоловое), спиртовые настойки. Однако существуют и такие препараты (например, антибиотик эритромицин, некоторые бактерийные лекарственные препараты), которые разрушаются в течение нескольких дней при низких температурах (около 0°С).

Снижение температуры оказывает различное воздействие на ЛВ. Так, ампулированные растворы, содержащие 0,1% адреналина гидрохлорида, 25–40% глюкозы, 25% магния сульфата, 10% кальция хлорида, 5% эфедрина гидрохлорида, 2% новокаина, сохраняют –43 С. В то же время бактерийные и некоторые другие препараты разлагаются при температуре ниже 0о, а растворы некоторых антибиотиков (колимицина сульфата, эритромицина и др.) разрушаются в течение нескольких дней при температуре от 6 до 20оС.

При многократном замораживании и оттаивании водных растворов происходят процессы, называемые криолизом. Особенно чувствительны к нему крахмал, глюкоза, стрептомицин, новокаин и т.д. Под влиянием ультразвуковых колебаний ускоряются реакции окисления, деструкции и др.



Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 |
 


Похожие работы:

«ПРИОРИТЕТНЫЙ НАЦИОНАЛЬНЫЙ ПРОЕКТ ОБРАЗОВАНИЕ РОССИЙСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ДРУЖБЫ НАРОДОВ Ю.П.КОЗЛОВ Т.М. ДМИТРИЕВА ГЛОБАЛЬНЫЕ ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ПРОБЛЕМЫ ПСИХОЛОГИИ ЧЕЛОВЕКА И ОБЩЕСТВА Учебное пособие Москва 2008 Экспертное заключение: доктор биологических наук, профессор В.Д. Ильичев, доктор биологических наук, профессор В.Н. Максимов Козлов Ю.П., Дмитриева Т.М. Глобальные экологические проблемы психологии человека и общества: Учебное пособие. - М.: РУДН, 2008. - 252 с. Учебное пособие посвящено...»

«Содержание Пояснительная записка..3 Методические рекомендации по изучению предмета и 1. выполнению контрольных работ..6 Рабочая программа дисциплины 2. Технология органических веществ.13 Контрольная работа 1 по дисциплине 3. Технология органических веществ.69 Контрольная работа 2 по дисциплине 4. Технология органических веществ.77 1 Пояснительная записка Данные методические указания по изучению дисциплины Технология органических веществ и выполнению контрольных работ предназначены для студентов...»

«А.В.Хапалюк ОБЩИЕ ВОПРОСЫ КЛИНИЧЕСКОЙ ФАРМАКОЛОГИИ И ДОКАЗАТЕЛЬНОЙ МЕДИЦИНЫ Допущено Министерством образования Республики Беларусь в качестве учебного пособия для слушателей системы последипломного медицинского образования Минск 2003 УДК 615.03+61 ББК 52.81 Х 12 Рецензенты: 2-я кафедра внутренних болезней Белорусского государственного медицинского университета (заведующий кафедрой – доктор медицинских наук профессор Н.Ф.Сорока), директор ГП Республиканский центр экспериз и испытаний в...»

«Юридический факультет Кафедра Гражданского права и предпринимательской деятельности ГРАЖДАНСКОЕ ПРАВО Тематика контрольных работ, курсовых работ и методические указания по их выполнению для студентов всех форм обучения направления БЮ Юриспруденция, и специальности 030901.65 Правовое обеспечение национальной безопасности специализация гражданско-правовая Сост.: Н. С. Махарадзе Т.Л. Калачева Хабаровск ТОГУ 2013 Содержание: 1. Методические указания к выполнению контрольных работ 2. Тематика...»

«Перечень электронных образовательных ресурсов, содержащихся в фонде библиотеки Университета Название № электронного Автор/Авторский Год Краткая аннотация электронного образовательного ресурса п/п образовательного коллектив издания ресурса Цель изучения дисциплины Экологическое право – дать студентам знания о предмете и системе экологического права, об объектах экологических отношений, о становлении и основных этапах развития Экологическое право и экологического права, о нормах экологического...»

«Смоленский промышленно-экономический колледж Методическое пособие Для семинарских занятий по дисциплине Химия (Бакалавариат) Составили: Матченко Н.А. Рецензент: Тригубова В.С. Допущено учебным Советом ИПР СПО в качестве учебно-методического пособия для преподавателей и студентов образовательных учреждений среднего профессионального образования. Методическое пособие Для семинарских занятий по дисциплине Химия (бакалавариат) Составили: Матченко Н.А.. Рецензент: Тригубова В.С. Смоленский...»

«Частное учреждение образования МИНСКИЙ ИНСТИТУТ УПРАВЛЕНИЯ УГОЛОВНОЕ ПРАВО РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ. ОСОБЕННАЯ ЧАСТЬ Учебно-методическая разработка Под общей редакцией проф. Э.Ф. Мичулиса МИНСК Изд-во МИУ 2012 1 УДК 343. 2(76) ББК 67. 99(2)8 У 26 Авторы: Н.А. Богданович, В.В.Буцаев, В.В.Горбач, Е.Н.Горбач, А.И.Лукашов, А.А. Мичулис, Э.Ф. Мичулис, В.И. Стельмах, Д.В. Шаблинская Рецензенты: Д.П. Семенюк, доцент кафедры АПр и управления ОВД Академии МВД Республики Беларусь, канд. юрид. Наук, доцент;...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФГАОУ ВПО СЕВЕРО-КАВКАЗСКИЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИНСТИТУТ ИНФОРМАЦИОННЫХ ТЕХНОЛОГИЙ И ТЕЛЕКОММУНИКАЦИЙ КАФЕДРА ОРГАНИЗАЦИИ И ТЕХНОЛОГИИ ЗАЩИТЫ ИНФОРМАЦИИ Утверждаю Проректор по учебной работе (подпись) _2013 г. Инженерная и компьютерная графика УЧЕБНОЕ ПОСОБИЕ Направление подготовки 090900 – Информационная безопасность Профиль подготовки Организация и технология защиты информации Квалификация (степень) выпускника Бакалавр Форма обучения...»

«База нормативной документации: www.complexdoc.ru МИНИСТЕРСТВО РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ПО АТОМНОЙ ЭНЕРГИИ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФЕДЕРАЛЬНОЕ УПРАВЛЕНИЕ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИХ И ЭКСТРЕМАЛЬНЫХ ПРОБЛЕМ 2.6.1. Ионизирующее излучение, радиационная безопасность ОБЪЕМНАЯ АКТИВНОСТЬ РАДИОНУКЛИДОВ В ВОЗДУХЕ НА РАБОЧИХ МЕСТАХ. ТРЕБОВАНИЯ К ОПРЕДЕЛЕНИЮ ВЕЛИЧИНЫ СРЕДНЕГОДОВОЙ АКТИВНОСТИ Методические указания МУ 2.6.1.44-2002 Содержание Введение 1. Область применения 2. Нормативные...»

«Филиал государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования Сибирский государственный университет путей сообщения Томский техникум железнодорожного транспорта (ТТЖТ – филиал СГУПС) Москалева О. В. Охрана труда Методические указания и контрольные задания Для студентов заочной формы обучения всех специальностей Томск 2010 Одобрено Утверждаю на заседании цикловой комиссии Заместитель директора по УМР Протокол № _ от _ 2010 г. Н.Н. Куделькина Председатель: _ С.Ф. Савко...»

«Список новых поступлений ИНИ-ФБ ДВГУ Владивосток. 690000 ул. Алеутская, 65 б Россия (10.05-14.05.2010) Автор Заглавие Место хранения Предмет Класс экземпляра Ч/З иностранной 85.103(4ЮгС) Научная Kosovo Orthodox Heritage and contemporary catastrophe ed. литературы, ауд by Alexei Lidov. Ч/З иностранной 67.99(4Вел) Научная Statutes on contract, tort and restitution 2006-2007 ed. by F. литературы, ауд D. Rose. Анализ многолетних рядов наблюдений за природными Хранение ООиЕФ Научная 502.4(571.6)...»

«Министерство образования Российской Федерации Сибирская государственная автомобильно-дорожная академия (СибАДИ) Кафедра организации перевозок и управления на транспорте РАЗРАБОТКА ИНФОРМАЦИОННОЙ СИСТЕМЫ НА ПРЕДПРИЯТИЯХ АВТОМОБИЛЬНОГО ТРАНСПОРТА Задание и методические указания для выполнения курсовой работы по дисциплине Информационные технологии на транспорте для студентов специальности 240400 Организация и безопасность движения заочной формы обучения Составитель Л.С. Трофимова Омск...»

«Порядок и организация контроля за наноматериалами : метод. указания МУ 1.2.2966-11 : утвержден Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом РФ 17 окт. 2011 г. – Введ. 17.10.2011. - Режим доступа: Система КонсультантПлюс ; Гарант. 1.2. Гигиена, токсикология, санитария Методические указания МУ 1.2.2966-11 Порядок и организация контроля за наноматериалами (утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав...»

«Министерство образования и науки Российской Федерации ФГАОУ ВПО УрФУ имени первого Президента России Б.Н.Ельцина А. А. Дурнаков, Н. А. Дядьков АРХИТЕКТУРА И СИСТЕМА КОМАНД ЦИФРОВЫХ СИГНАЛЬНЫХ ПРОЦЕССОРОВ СЕМЕЙСТВА ADSP - 21XX Учебное электронное текстовое издание Подготовлено кафедрой Радиоэлектроника информационных систем Научный редактор доц., канд. техн. наук В. А. Добряк Методические указания к лабораторной работе по курсу Электроника и схемотехника для студентов всех форм обучения...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ТЕХНИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ “МАМИ А.И. Сергеев, А.С. Шевелев ИСПЫТАНИЯ ТРАКТОРОВ И ТРАНСПОРТНО-ТЯГОВЫХ МАШИН Методические указания к лабораторным работам № 1, 2 и 3 по дисциплине “Испытания тракторов и транспортно-тяговых машин” Одобрено методической комиссией факультета АТ Москва 2011 2 Разработано в соответствии с Государственным...»

«Федеральное государственное казенное образовательное учреждение высшего образования АКАДЕМИЯ СЛЕДСТВЕННОГО КОМИТЕТА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ УТВЕРЖДАЮ И.о. ректора федерального государственного казенного образовательного учреждения высшего образования Академия Следственного комитета Российской Федерации генерал – майор юстиции А.М. Багмет 2014 г. РАБОЧАЯ ПРОГРАММА УЧЕБНОЙ ДИСЦИПЛИНЫ Основы геополитики по направлению подготовки (специальности) 030901 Правовое обеспечение национальной безопасности...»

«Министерство образования и науки Российской Федерации Сыктывкарский лесной институт (филиал) федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования СанктПетербургский государственный лесотехнический университет имени С. М. Кирова КАФЕДРА ОБЩЕЙ И ПРИКЛАДНОЙ ЭКОЛОГИИ О. А. Конык ЭКОЛОГИЧЕСКИЙ МЕНЕДЖМЕНТ И ЭКОЛОГИЧЕСКОЕ АУДИРОВАНИЕ УЧЕБНОЕ ПОСОБИЕ Утверждено учебно-методическим советом Сыктывкарского лесного института в качестве учебного пособия...»

«Ю.А. АЛЕКСАНДРОВ Основы производства безопасной и экологически чистой животноводческой продукции ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ОБРАЗОВАНИЮ ГОУВПО МАРИЙСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ Аграрно-технологический институт Ю.А. АЛЕКСАНДРОВ ОСНОВЫ ПРОИЗВОДСТВА БЕЗОПАСНОЙ И ЭКОЛОГИЧЕСКИ ЧИСТОЙ ЖИВОТНОВОДЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ УЧЕБНОЕ ПОСОБИЕ Йошкар-Ола, 2008 ББК П6 УДК 631.145+636:612.014.4 А 465 Рецензенты: В.М. Блинов, канд. техн. наук, доц. МарГУ; О.Ю. Петров, канд. с.-х. наук, доц. МарГУ Рекомендовано к...»

«3 Настоящие методические указания предназначены для студентов всех форм обучения специальности 250403.65 Технология деревообработки, выполняющих выпускные квалификационные работы (ВКР) по сушке древесины. Сушка древесины относится к важнейшему процессу технологии деревообработки, призванному обеспечить цехи, производящие готовую продукцию, сухими пиломатериалами и заготовками высокого качества в соответствии с эксплуатационными требованиями, предъявляемыми к изделиям и сооружениям из древесины,...»

«0 Е.А. Клочкова Промышленная, пожарная и экологическая безопасность на железнодорожном транспорте Москва 2008 1 УДК 614.84:656.2+504:656.2 ББК 39.2 К 50 Р е ц е н з е н т ы: начальник службы охраны труда и промышленной безопасности Московской железной дороги — филиала ОАО РЖД Г.В. Голышева, ведущий инженер отделения охраны труда ВНИИЖТа Д.А. Смоляков Клочкова Е.А. К 50 Промышленная, пожарная и экологическая безопасность на железнодорожном транспорте: Учебное пособие. — М.: ГОУ...»








 
© 2013 www.diss.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, Диссертации, Монографии, Методички, учебные программы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.