WWW.DISS.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
(Авторефераты, диссертации, методички, учебные программы, монографии)

 

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 6 |

«С.Ю. Гармонов, Н.С. Шитова, Л.М. Юсупова КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА И БЕЗОПАСНОСТЬ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ Учебное пособие Казань КГТУ 2008 УДК 615:658.012.7(075) ББК 52.81:30.607(075) Г 20 ...»

-- [ Страница 3 ] --

Обнаружение производных фенотиазина (аминазин, дипразин, пропазин, хлорацизин, трифтазин) проводят по реакции с бромной водой, при этом в зависимости от конкретного соединения образуются продукты различной окраски:

Процесс, обратный галогенированию, – дегалогенирование – используют для анализа хлор-, бром- и йодпроизводных органических лекарственных препаратов.

Галогены в органической молекуле связаны не ионогенной, а ковалентной связью. В зависимости от прочности этой связи применяют различные способы дегалогенирования, например отщепление галогена под действием раствора нитрата серебра:

или щелочное отщепление:

Процесс дехлорирования можно осуществлять нагреванием препарата (хлорэтил, хлороформ) в спиртовом растворе едкой щелочи или в водно-спиртовой среде с раствором нитрата серебра. Этот способ лежит в основе определения органически связанного хлора в молекуле производных бис-(-хлорэтил)-амина. Происходит процесс дехлорирования с образованием хлорид-иона. Последний сразу же осаждается ионом серебра:

В отличие от элементного анализа органическая часть молекулы при этом не разрушается. Если ковалентная связь более прочна, то хлорид-ион образуется только после предварительного нагревания препарата с раствором гидроксида натрия.

Аналогичным образом анализируют бромсодержащие органические ЛВ (бромизовал).

Образовавшийся при кипячении в растворе щелочи ион брома окисляют хлорамином до свободного брома, который окрашивает слой хлороформа в желто-бурый цвет.

4.4.4. Реакции конденсации карбонильных соединений Реакции конденсации альдегидов и кетонов с первичными аминами, гидроксиламином, гидразинами, семикарбазидом, тиосемикарбазидом и другими аминопроизводными идут по общей схеме:

Эту группу химических реакций используют для идентификации ЛВ, содержащих в молекуле аминогруппу, альдегидную или кетогруппу.

При взаимодействии альдегидов с первичными аминами в кислой среде происходит конденсация с образованием солей оснований Шиффа:

Эти соединения имеют обычно желтую, красную или оранжевую окраску. Реакцию используют для идентификации сульфаниламидов и других первичных ароматических аминов, применяя в качестве реактива 4-диметиламинобензальдегид, коричный альдегид и другие альдегиды. Реакция образования окрашенных оснований Шиффа лежит в основе лигниновой пробы на первичные ароматические амины.

Для идентификации кетопроизводных используют реакцию образования гидразонов и реакцию получения кетоксимов:

Кетоны, вступая в реакции конденсации с различными гидразинами (фенилгидразин, 2,4-динитрофенилгидразин), образуют гидразоны, а взаимодействуя с гидроксиламином, дают кетоксимы. И те, и другие представляют собой бесцветные или окрашенные устойчивые соединения, нерастворимые в воде, со стабильной температурой плавления. Это позволяет использовать их для установления подлинности таких кетонов, как камфара, бромкамфара, а также стероидных соединений, содержащих в молекуле кетогруппу.

Для идентификации ЛВ используют также процесс, обратный конденсации, в результате которого образуются альдегиды и кетоны. Последние затем обнаруживаются по характерному запаху или с помощью цветных реакций (фтивазид, эфедрин и др.).

Процесс окислительного расщепления и образования азометинового красителя лежит в основе нингидриновой реакции. При нагревании с нингидрином (трикетогидринденгидрат) растворов аминокислот, иминокислот, пептонов, полипептидов, первичных и вторичных алифатических аминов возникает окрашивание. Наиболее широко нингидриновая реакция используется для идентификации и фотоколориметрического определения - и аминокислот, в присутствии которых появляется темно-синяя окраска. Она обусловлена образованием замещенной соли дикетогидринденкетогидринамина – продукта конденсации избытка нингидрина с аммиаком, выделившимся при окислении испытуемой аминокислоты:

Более поздние исследования нингидриновой реакции показали, что появляющаяся окраска присуща не одному соединению, а нескольким окрашенным веществам в зависимости от химической структуры исходной аминокислоты. Однако во всех случаях образуется фиолетового цвета бис-1,3-дикетоинденил:

В фармацевтическом анализе нингидриновую реакцию используют для идентификации аминокислот (кислота глутаминовая, кислота аминокапроновая, фенибут, аминалон, метионин) и их производных (сарколизин, дииодтирозин и др.).

Кроме аминокислот и их производных нингидрин в слабощелочной среде образует окрашенные, как и в случае алифатических аминокислот, сине-фиолетовые продукты реакции с мезатоном и эфедрином. Положительную реакцию в этих условиях дают также рибофлавин (зеленое окрашивание), изониазид (нестойкое красное), эуфиллин (краснофиолетовое).

По химизму с нингидриновой реакцией сходна мурексидная проба, основанная на окисление молекулы пурина с образованием метилированных производных аллоксантина.

Последующее действие аммиака приводит к образованию аммонийной соли метилированного производного пурпуровой кислоты, окрашенного в пурпурно-красный цвет:

O N OO N O

Мурексидную пробу используют для испытания подлинности производных пурина (кофеин, теобромин, теофилин и др.).

Альдегиды, спирты, органические кислоты, ангидриды кислот, барбитураты образуют окрашенные продукты конденсации с фенолами. Процесс конденсации лежит в основе цветной реакции формальдегида с салициловой и хромотроповой кислотой. В этих реакциях последовательно происходят процессы конденсации, а затем окисления с образованием окрашенных соединений пара-хиноидной структуры (ауриновый краситель):

Концентрированная серная кислота оказывает дегидратирующее действие в реакции конденсации и, кроме того, является окислителем при образовании хиноидного соединения. Эту цветную реакцию применяют для обнаружения формальдегида, выделяющегося при окислении метилового спирта, а также при гидролизе некоторых ЛВ (никодин, метазид, гексамидин и др.). К этому типу можно отнести реакцию резорцина с фталевым ангидридом, сопровождающуюся образованием флуоресцина.

В основе взаимодействия гексаметилентетрамина с фенолами в присутствии концентрированной серной кислоты лежит рассмотренная выше реакция образования ауринового красителя. Но этот реактив образует окрашенные соединения и с ментолом, терпингидратом, промедолом (красное), а также с производными бензиловой кислоты – амизилом, бензацином, метацином (сине-зеленое) и этакридином (зеленое).

Вместе с тем производные дифенилуксусной и дифенилпропионовой кислоты (апрофен, спазмолитин) в этих условиях положительной реакции не дают.

Ряд ЛВ, содержащих в молекуле фенильный радикал (промедол, фенобарбитал), подвергаются формальдегидом и концентрированной серной кислотой окислительной конденсации:

При осторожном наслаивании на раствор формальдегида в концентрированной серной кислоте раствора препарата на границе слоев появляется кольцо красного цвета.

Ароматические альдегиды образуют окрашенные продукты с соединениями, содержащими в молекуле активную метиленовую группу (камфара):

С помощью ванилина можно обнаружить наличие индольного цикла в молекуле (стрихнин, резерпин).

4.4.6. Окислительно-восстановительные реакции Окислительно-восстановительные процессы лежат в основе многих химических реакций, используемых для испытания подлинности ЛВ.

Препараты, содержащие в молекуле непредельные связи (сферофизина бензоат, карбокромен, нистанин, амфотерицин В), под действием окислителей (перманганата калия) подвергаются окислительной гидратации:

При этом происходит обесцвечивание раствора перманганата калия. Таким образом проводят обнаружение новокаина, молочной кислоты, кальция лактата:

Препараты, содержащие в молекуле хинонную группу (викасол), под действием восстановителей (цинковая пыль в присутствии минеральных кислот) гидрируются до образования фенольных групп:

Реакцию окисления спиртов до альдегидов используют для идентификации ЛВ, содержащих в молекуле первичную спиртовую группу:

Вторичные спирты при окислении образуют кетоны:

Широко используют в фармацевтическом анализе реакцию окисления альдегидов до кислот:

Восстановительные свойства ЛВ, производных альдегидов (формальдегид, хлоралгидрат, цитраль, глюкоза), изоникотиновой кислоты (изониазид, салюзид), стероидных гормонов, содержащих в молекуле -кетольную группу, антибиотиков тетрациклинового и стрептомицинового ряда устанавливают с помощью реакции образования «серебряного зеркала», а также реактивом Несслера или Фелинга.

Реакция образования «серебряного зеркала» основана на восстановлении серебра из аммиачного раствора оксида серебра:

Процесс окисления лежит в основе использования «серебряного зеркала» и реактива Фелинга для обнаружения -кетольной группы в стероидных соединениях (кортизона ацетат, гидрокортизон, преднизолон, ДОКСА):

СOOK СOOK

СOOK СOOK

Хлоралгидрат также вступает в реакцию «серебряного зеркала»:

Реактив Фелинга представляет собой смесь приготавливаемых отдельно растворов:

раствора сульфата меди и раствора, содержащего сегнетову соль (соль винной кислоты) и гидроксид натрия.

Обнаружение восстановительной способности глюкозы проводится следующим образом:

HС O HС OH

СOOK СOOK

В результате последней реакции вначале образуется желтый осадок гидроксида меди (II), а затем красный осадок оксида меди (II).

Аналогичный процесс лежит в основе определения рутина:

OH OH O OH

Восстановительные свойства альдегидов могут быть использованы для испытания подлинности неорганических ЛВ (соединений ртути, серебра).

Препараты, содержащие в молекуле гидразинную группу (изониазид, апрессин), под действием раствора сульфата меди, аммиачного раствора серебра окисляются по схеме:

Так, реакция изониазида с раствором сульфата меди используется для обнаружения его восстановительной способности:

Значительная группа ЛВ претерпевает химические превращения под действием окислителей. Окрашенные продукты окисления образуют гетероциклические соединения, производные пиразолона и фенотиазина; алкалоиды, производные бензилизохинолина (папаверин), морфинала (морфин, кодеин, апоморфин), индола (резерпин). Процесс окисления использован в талейохинной (хинин) пробах (аналитический сигнал – зеленое окрашивание):

NH CHOH

При действии на -гидроксикарбоновые кислоты (адреналина гидроаратат, натрия цитрат, кальция лактат, ацеклидин) минеральными кислотами в присутствии окислителей происходит разложение:

R C COOH

В основе испытаний подлинности гормонов, имеющих в молекуле фенольный гидроксил, а также препаратов ряда витаминов лежат химические реакции, основанные на их окислении. В качестве окислителей используют галогены (раствор йода, бромную воду) или вещества, легко отщепляющие галогены (хлорамины, гипохлориды), а также растворы пероксида водорода, перманганата калия, дихромата калия, солей церия и др.

5. УСТАНОВЛЕНИЕ ДОБРОКАЧЕСТВЕННОСТИ

ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

Основной критерий доброкачественности ЛС определяется отсутствием в нем токсичных примесей и/или наличием физиологически неактивных примесей в допустимых стандартами пределах. Последние устанавливаются на основании результатов биологических испытаний. Присутствие примесей в допустимых пределах не должно влиять на качество ЛС и его терапевтический эффект; этот факт можно рассматривать как своеобразное указание на степень очистки ЛВ. Однако в слишком большом количестве они снижают концентрацию активной субстанции в ЛС и уменьшают его активность. Условность критерия доброкачественности связана с чувствительностью выбранного метода фармацевтического анализа.

5.1. Источники и причины недоброкачественности Среди источников и причин недоброкачественности наиболее важными являются следующие:

– плохая очистка исходного сырья;

– побочные продукты синтеза;

– механические загрязнения (остатки фильтрующих материалов, растворителей и т.

п.);

– примеси материалов аппаратуры (металлы, стекло);

– перекрестное загрязнение (при получении в производственном помещении нескольких ЛВ, которые могут содержаться в виде аэрозолей в воздухе);

ции (ЛС).

На качество ЛВ могут оказывать влияние несколько групп факторов. Основные из них представлены ниже.

Технологические факторы – группа факторов, оказывающих влияние в процессе синтеза ЛВ. Степень чистоты исходных веществ, температурный режим, давление, рН среды, растворители, применяемые в процессе синтеза и для очистки, режим и температура сушки – все эти факторы могут привести к появлению примесей, которые накапливаются от одной стадии к другой. При этом может происходить образование продуктов побочных реакций или продуктов распада, процессы взаимодействия исходных и промежуточных продуктов синтеза с образованием таких веществ, от которых трудно отделить конечный продукт. В процессе синтеза возможно образование различных таутомерных форм как в растворах, так и в кристаллическом состоянии. Например, многие органические соединения могут существовать в амидной, имидной и других таутомерных формах. Нередко в зависимости от условий получения, очистки и хранения ЛВ может представлять собой смесь таутомерных или изомерных форм, в том числе оптических, различающихся по фармакологической активности.

Полиморфизм – группа факторов, способствующих образованию различных кристаллических модификаций. Около 65% ЛВ, относящихся к числу барбитуратов, стероидов, антибиотиков, алкалоидов и других, образуют по 1–5 и более различных модификаций.

Остальные дают при кристаллизации стабильные полиморфные и псевдополиморфные модификации. Они различаются как по физико-химическим свойствам и фармакологическому действию, так и по величине свободной поверхностной энергии, а следовательно, имеют неодинаковую устойчивость к действию кислорода воздуха, света, влаги. Это вызвано изменениями энергетических уровней молекул, что оказывает влияние на спектральные, термические свойства, растворимость и абсорбцию ЛВ. Образование полиморфных модификаций зависит от условий кристаллизации, используемого при этом растворителя, температуры. Превращение одной полиморфной формы в другую происходит при хранении, сушке, измельчении. Например, избыточная влажность может вызвать гидролиз ЛС, образование продуктов омыления, появление патологических микроорганизмов и другие процессы, что не только снижает терапевтический эффект ЛС, но и приводит к появлению токсических продуктов или продуктов с иным характером фармакологического действия.

Некоторые из перечисленных выше источников загрязнения ЛВ могут обусловливать присутствие в них нелетучих примесей с большим содержанием неорганических веществ – зольный остаток. ГФ допускает для каждого ЛВ определенный предел зольности, так как в большинстве случаев зола не содержит таких вредных примесей, как тяжелые металлы, мышьяк и другие, которые рекомендуется анализировать в ЛВ.

В ЛВ, получаемых из растительного и животного сырья, основными примесями являются сопутствующие природные соединения (алкалоиды, ферменты, белки, гормоны и др.). Многие из них очень сходны по химическому строению и физико-химическим свойствам с основным продуктом экстракции. Поэтому их очистка представляет большую сложность.

Большое влияние на загрязнение примесями одних лекарственных препаратов другими может оказать запыленность производственных помещений химико-фармацевтических предприятий. В рабочей зоне этих помещений при условии получения одного или нескольких препаратов (ЛФ) все они могут содержаться в виде аэрозолей в воздухе. При этом происходит так называемое «перекрестное загрязнение». Более подробно этот фактор будет рассмотрен в разделе 5.3.

Важное значение для качества лекарств имеет не только технологический процесс, но и условия хранения. На доброкачественность препаратов оказывает влияние излишняя влажность, которая может привести к гидролизу. В результате гидролиза образуются основные соли, продукты омыления и другие вещества с иным характером фармакологического действия. При хранении препаратов-кристаллогидратов (натрия арсенат, меди сульфат и др.) необходимо, наоборот, соблюдать условия, исключающие потерю кристаллизационной воды.

При хранении и транспортировке препаратов необходимо учитывать воздействие света и кислорода воздуха. Под влиянием этих факторов может происходить разложение, например, таких веществ, как хлорная известь, серебра нитрат, иодиды, бромиды и т.д.

Большое значение имеет качество тары, используемой для хранения лекарственных препаратов, а также материал, из которого она изготовлена. Последний тоже может быть источником примесей.

Содержание всех примесей должно строго контролироваться, чтобы исключить присутствие токсичных соединений и наличие индифферентных веществ в ЛС в таких количествах, которые мешают их использованию для конкретных целей. ЛВ должно иметь достаточную степень чистоты, т.е. отвечать требованиям определенной спецификации.

ЛВ является чистым, если дальнейшая очистка не меняет его фармакологической активности, химической стабильности, физических свойств и биологической доступности.

В последние годы в связи с ухудшением экологической обстановки на наличие примесей тяжелых металлов испытывают и лекарственное растительное сырье. Важность проведения таких испытаний вызвана тем, что при проведении исследований шестидесяти различных образцов растительного сырья установлено содержание в них 14 металлов, в том числе таких токсичных, как свинец, кадмий, никель, олово, сурьма, таллий. Их содержание в большинстве случаев значительно превышает установленные ПДК для овощей и фруктов.

Фармакопейный тест на определение примесей тяжелых металлов – один из широко применяемых во всех национальных фармакопеях мира, которые рекомендуют его для исследования не только индивидуальных ЛВ, но и масел, экстрактов, ряда инъекционных ЛФ.

5.2. Общие требования к испытаниям лекарственного средства на доброкачественность Фармакопейные стандарты доброкачественности устанавливаются с учетом следующих факторов:

– физиологического действия примесей;

– дозы, в которой обычно применяется ЛВ;

– способа его введения.

Присутствие одной и той же примеси может допускаться в определенных пределах в одном ЛС, а в другом – быть недопустимым. Так, ионы калия являются физиологическими антагонистами ионов натрия, поэтому в хлориде натрия, который используется для приготовления изотонических растворов, недопустимо присутствие примесей солей калия. В то же время эта примесь не является опасной в ЛС, представляющем собой водный раствор кальция хлорида для инъекций; ее присутствие допускается нормативами ГФ.

Однако примесь ионов магния, который является физиологическим антагонистом кальция, строго регламентируется как недопустимая.

Очень строгими являются стандарты ГФ на различные примеси в лекарственных и диагностических средствах, которые назначаются в больших дозах при разовом приеме (десятки граммов). Если в ЛВ будет содержаться какая-либо недопустимая примесь или превышена норма допустимых примесей, может произойти отравление.

Особые стандарты доброкачественности устанавливаются для ЛВ, предназначенных для приготовления инъекционных растворов.

Для каждого ЛВ в статьях ГФ X и ГФ XI приводится перечень показателей, по которым устанавливается его доброкачественность:

– внешний вид;

– растворимость;

– температуры плавления и кипения;

– рН водного раствора;

– окраска;

– прозрачность (или степень мутности);

– зольный остаток;

– содержание летучих веществ и воды;

– кислотное число;

– йодное число;

– эфирное число;

– допустимые и недопустимые примеси;

– адсорбционная способность;

– дисперсность;

– наличие веществ – красителей и др.

Основополагающие принципы испытаний ЛВ для установления соответствия их фармакопейным стандартам изложены в общей статье ГФ XI «Испытания на чистоту и допустимые пределы примесей» и другой НД. Отклонение от них указывает на изменение качества ЛС (в частности, это может произойти в процессе хранения).

При испытаниях на доброкачественность ЛВ следует строго выполнять определенные требования:

1. Используемые химические реактивы не должны содержать примеси, определяемые в этих испытаниях. Соответствующие стандарты качества реактивов приводятся в специальном разделе ГФ.

2. Возможность обнаружения определенного вещества в присутствии других часто зависит от выбора оптимальных условий испытаний (например, рН) и использования специфических реакций.

3. Предпочтение отдается высокочувствительным реакциям; их предельная чувствительность (в миллиграммах на 1 мл раствора) указывается в общей статье ГФ XI «Испытания на чистоту и допустимые пределы примесей».

4. При определении окраски, прозрачности и степени мутности жидкостей их сравнивают с эталонами, приготовление которых прописано в ГФ.

5. Определение содержания примесей в испытуемом образце осуществляется двумя способами:

– для установления пределов содержания допустимых примесей в ЛС используют химическую реакцию, в результате которой образуется окрашенный раствор или осадок. Количественную оценку проводят путем сравнения исследуемых и эталонных растворов, содержащих определяемые примеси в допустимых концентрациях, причем используются наиболее чувствительные реакции; ошибка испытаний – до 10%; указания о приготовлении эталонных растворов и содержании в них соответствующих примесей даются в общей статье ГФ XI; учитывается также присутствие других веществ при открытии ионов и рассматриваются меры по устранению их влияния на ход испытаний;

– для установления отрицательной реакции на недопустимые в ЛС примеси к испытуемому раствору добавляют все реактивы, кроме основного, открывающего данную примесь. Затем анализируемый раствор делят на две равные части и к одной добавляют основной реактив; сравнение проводят с частью раствора без добавки основного реактива; в этих испытаниях используются химические реакции, чувствительность которых ниже, чем предел обнаружения допустимых примесей; ошибка такого определения может составлять более 10%.

Эталонные растворы характеризуются известным содержанием примеси (определенного иона, вещества) в данном ЛВ. Их готовят из веществ, имеющих постоянный химический состав, с использованием точных навесок и специальной мерной посуды. В зависимости от содержания примесей растворы подразделяются на две группы. Первые содержат максимально допустимые количества примесей, они устойчивы и имеют продолжительный срок хранения, а вторые представляют собой более разбавленные растворы, полученные из растворов первой группы добавлением воды в определенном соотношении, их готовят при необходимости и используют, как правило, в день приготовления.

Для наиболее часто обнаруживаемых в ЛВ примесей ионов, таких как хлориды, сульфаты, ионы аммония, кальция, железа, цинка и других тяжелых металлов, мышьяка, созданы унифицированные методики, которые включены в общую статью ГФ XI «Испытания на чистоту и допустимые пределы примесей». Некоторые ЛВ дополнительно подвергают испытаниям на наличие примесей карбонатов, нитратов, фосфатов, сульфитов, цианидов, ионов бария, магния, марганца, меди и др. Методики определения таких примесей описаны в каждом конкретном случае с указанием их допустимых пределов.

6. Оценка доброкачественности ЛВ (как и подлинности) проводится на основании определения показателей, соответствующих следующим физическим и физико-химическим свойствам вещества:

– температурам плавления и кипения, разложения (устанавливают согласно требованиям ГФ по описанным методикам);

– растворимости (в воде, растворах кислот, щелочей, органических растворителях);

– удельному вращению (определяют поляриметрически в растворах анализируемых веществ при использовании соответствующего растворителя);

– удельному показателю поглощения раствора (определяют спектрофотометрически) и др.

Основная особенность испытаний заключается в том, что в качестве стандартов в ГФ и другой НД используются не константы индивидуальных (без примесей) веществ, обычно приводимые в физико-химических справочниках, а допустимые относительно качества ЛВ пределы изменения этих констант при условии сохранения достаточной степени чистоты.

7. Испытания на доброкачественность ЛВ осуществляют при строгом соблюдении следующих общих указаний ГФ и другой НД:

– точность взятия навески вещества составляет 0,001 г, причем указанную массу навески нельзя изменять произвольно, поскольку содержание примесей регламентируется в определенной массе или объеме ЛВ;

– химическая посуда, используемая при сравнении эталонов с исследуемыми растворами, должна быть одинаковой (толщина стенок, прозрачность, бесцветность пробирок и т. п.);

количествах к эталону и исследуемому раствору; опалесценцию наблюдать в проходящем свете на темном фоне, а окраску раствора – в отраженном свете на белом фоне;

– поддержание необходимого рН раствора, последовательность и скорость добавления реактивов, интервал времени наблюдения за результатами реакций следует строго воспроизводить согласно требованиям ГФ.

Тщательному контролю качества подвергают не только ЛВ, но и другие компоненты ЛС, которые могут быть источниками допустимых и недопустимых примесей.

Для установления доброкачественности ЛВ используются не только рассмотренные выше химические методы, но и физические (рефрактометрию, поляриметрию, спектрофотометрию, фотоколориметрию, эмиссионную и атомно-абсорбционную пламенную спектроскопию и др.) и физико-химические (хроматографию, потенциометрию, электрофорез, полярографию и др.) методы анализа, которые подробно описаны в специальной литературе по аналитической химии.

Если заключение о доброкачественности (или токсичности) ЛВ не удается сделать с помощью физических, химических и физико-химических методов анализа, то применяют биологические методы. К ним обращаются и в тех случаях, когда способ получения не гарантирует постоянства активности ЛВ (например, для антибиотиков). Активность ЛВ выражается в единицах действия (ЕД). Испытания проводятся на животных, изолированных органах, отдельных группах клеток, штаммах микроорганизмов.

Согласно ГФ, биологическому контролю подлежат сердечные средства, гормональные ЛС, антибиотики, элементорганические ЛС. Методики испытаний приведены в соответствующих статьях ГФ. Например, каждая выпускаемая серия мышьяксодержащих ЛС обязательно испытывается на токсичность, а также на противотрипаносомную активность.

Испытания на стерильность также осуществляются методами биологического анализа.

Для этого делают специальные посевы на питательных средах для выращивания бактерий или фильтруют растворы через мембранные фильтры с определенным размером пор. Стерильность устанавливается для гормональных ЛС, антибиотиков, вакцин, сывороток и др.

Биологические методы применяют в испытаниях на пироген-ностъ. Пирогенные вещества представляют собой липополисаха-риды, являются эндотоксинами (размером от нм до 1 мкм) и при попадании в кровь во время инъекций вызывают резкое повышение температуры, лейкопению и др. Испытания на пирогенность в обязательном порядке осуществляют для всех инъекционных растворов. Традиционно опыты проводят на животных, процесс испытаний является продолжительным, трудоемким и результат зависит от индивидуальных свойств животных. Это обусловливает актуальность разработки химических и физико-химических методов, позволяющих достоверно обнаруживать пирогены (использование специфических реактивов на липополисахаридные пирогены; образование окрашенных соединений, поглощающих свет в определенной области спектра; люминесценция; подавление пирогенами полярографического максимума кислорода).

5.3. Перекрестное загрязнение в химико-фармацевтическом производстве: стандартизация и Не является секретом, что сфера обращения ЛС остается зоной повышенного риска. В связи с этим большинство стран закрепляют на государственном уровне строгие меры контроля в соответствии с международными правовыми нормами. Эта одна из немногих позиций глобального межгосударственного взаимодействия, где присутствует единая идеология – перенос акцента с контроля качества готовой продукции на обеспечение качества на всех этапах производства ЛС.

Основные принципы обеспечения качества и контроля качества взаимосвязаны и имеют первостепенное значение в организации производства ЛС. Обеспечение качества является комплексной задачей, решение которой требует реализации всех мер, направленных на достижение заданных требований к качеству ЛС. Контроль качества включает в себя отбор проб, проведение испытаний (анализов) и оформление соответствующей документации.

В основных требованиях, предъявляемых к производству, существует такое положение, как «Предотвращение перекрестного загрязнения». Лекарственные препараты могут быть загрязнены другими препаратами или активными фармацевтическими субстанциями, моющими или дезинфицирующими средствами, микроорганизмами, частицами пыли, смазочными материалами, вспомогательными веществами, промежуточной продукцией и др. Во многих случаях при производстве различных препаратов используется одно и то же оборудование. Поэтому для предотвращения контаминации каждого последующего препарата предыдущим или предыдущей серией того же наименования очень важным является проведение эффективной процедуры очистки оборудования.

Очистка оборудования должна проводиться после окончания производственного цикла в течение времени, установленного в стандартной операционной процедуре (СОП). В СОП должны быть описаны:

– способ очистки с указанием каждого критического шага;

– перечень участков оборудования, требующих повышенного внимания;

– перечень съемных частей оборудования и описание проведения процедуры разборки, необходимой для эффективной очистки;

– перечень используемых моющих средств и/или растворителей и их концентрация;

– список инвентаря, применяемого для очистки оборудования;

– проведение визуальной проверки чистоты оборудования;

– маркировка, используемая для обозначения статуса оборудования.

В связи с этими требованиями помещения и оборудование следует располагать, проектировать, конструировать и эксплуатировать таким образом, чтобы они соответствовали проводимым операциям. Их расположение и конструкция должны сводить к минимуму риск ошибок и обеспечивать возможность эффективной очистки и обслуживания в целях исключения перекрестной контаминации, накопления загрязнений и любых неблагоприятных факторов для качества продукции.

Следует периодически проверять эффективность мер по предотвращению перекрестного загрязнения в соответствии с утвержденными инструкциями. Для этого определяются растворимые и нерастворимые остатки предыдущего препарата в отобранных пробах. При отборе проб следует использовать такие методы, как взятие мазков, смывов, или альтернативные (например, метод плацебо). Используемые методы отбора проб должны позволять проводить количественное определение остатков на поверхности оборудования после его очистки. Следует использовать аттестованные (валидированные) аналитические методы, обладающие достаточной чувствительностью для определения допустимого уровня остатков или загрязнений. Для каждого метода следует определить его воспроизводимость.

Предельно допустимые количества остатков должны быть реальными, достижимыми, обоснованными и основываться на остатке наиболее опасного вещества. Предельно допустимые уровни остатков могут устанавливаться на основе минимальной известной фармакологической, токсикологической или физиологической активности ЛС.

Как известно, всесторонняя оценка терапевтической или профилактической ценности ЛС, т.е. их эффективности и относительной безопасности (безвредности), проводится в отношении новых препаратов до начала их полномасштабного коммерческого производства. Приемлемость же серийной продукции проверяется по показателям качества, т.е. по косвенным, техническим характеристикам, изложенным в фармакопейных или иных официальных стандартах. В отношении других потребительских товаров проверка приемлемости серийной продукции связана, хотя бы частично, с прямым определением потребительских свойств.

Поскольку основной вид контроля качества лекарств – разрушающий, крайне редко используется сортировка на основе 100% проверки сомнительных по качеству серий (партий) с удалением бракованных единиц продукции. По этой причине не только потребитель, но и производитель заинтересованы в том, чтобы исключить или хотя бы свести к минимуму вероятность изготовления некачественных лекарств. Исходя из этих соображений во всех странах, имеющих дееспособные государственные органы здравоохранения, лекарственный рынок регулируется, прежде всего, с целью обеспечения безопасности и эффективности обращающихся на нем препаратов, приемлемого уровня их качества.

Чистые помещения являются показателем высоких технологий производства и обеспечения качества. Нужно так построить технологию и организацию производства, чтобы невозможно было выпустить продукцию низкого качества и надежности. Это принципиальная основа современного подхода к обеспечению качества. Важной частью его является технология чистоты. Чистые технологии относятся к наиболее современным и прогрессивным отраслям науки и техники, пользующимся в передовых странах серьезной государственной поддержкой. В России наблюдаются положительные сдвиги в распространении понимания важности этой проблемы, создаются серьезные предпосылки формирования полноценной отрасли промышленности чистых помещений.

Чистым помещением называется помещение, в котором счётная концентрация аэрозольных частиц и число микроорганизмов в воздухе поддерживаются в определённых пределах.

Класс чистого помещения характеризуется классификационным числом, определяющим максимально допустимую счётную концентрацию аэрозольных частиц определённого размера в 1 м3 воздуха. Следует различать три фазы создания и существования чистого помещения:

– построенное, когда чистое помещение построено и действует, но технологическое оборудование не установлено или не работает, а материалы и персонал отсутствуют;

– оснащенное, когда чистое помещение построено и действует, технологическое оборудование установлено и действует в соответствии с соглашением между покупателем и поставщиком, а персонал отсутствует;

– эксплуатируемое, когда чистое помещение функционирует в соответствии с предусмотренными требованиями и присутствует необходимый персонал.

Это разделение имеет принципиальное значение при проектировании, строительстве, аттестации и эксплуатации чистых помещений. В некоторых случаях оно учитывается системой классификации чистых помещений, например, в Правилах производства ЛС – GMP ЕС. В табл. 4 представлена классификация чистых помещений по международному стандарту ИСО 14644–1. Этой классификации соответствует и российский стандарт ГОСТ Р 50766–95, в котором вместо ИСО указано обозначение Р (российский) и добавлен в скобках класс чистоты по американскому стандарту 209D. Например, класс ИСО 5 имеет обозначение Р 5 (100).

Предельно допустимое число частиц в 1 м3 воздуха размером, Класс равным и превышающим, мкм чистоты GMP ЕС регламентирует основные требования к чистоте воздуха при производстве стерильных ЛС в оснащенном и эксплуатируемом состоянии. Для производства стерильных ЛС выделяют четыре типа зон (табл. 5). Тип А: локальные зоны для операций с высокой степенью риска, например, зоны наполнения, укупорки, вскрытия ампул, осуществления соединений в асептических условиях. Тип В: для асептической подготовки и наполнения – пространство, окружающее зону типа А. Типы С и D: чистые зоны для выполнения менее ответственных этапов производства стерильных продуктов.

Таблица 5. Классы чистоты производственных помещений по GMP Окружающий нас воздух содержит большое количество как живых, так и неживых частиц, отличающихся по своей природе и размерам (рис. 7).

Микрозагрязнения выделяются персоналом, ограждающими конструкциями, оборудованием, проникают в чистое помещение из окружающей среды. В среднем в чистом помещении 70–80% микрозагрязнений приходится на человека, 15–20% – на оборудование, 5–10% – на окружающую среду. Видно, что проблема чистых помещений носит комплексный характер. Недостаточно создать собственно чистое помещение, которое обеспечивает нужный класс чистоты при отсутствии технологического оборудования и персонала. Нужно одновременно применять оборудование, выделяющее минимум загрязнений или не выделяющее их вообще, одеть людей в «непылящую» одежду и т. д. Иначе значительные затраты на создание чистых помещений попросту бессмысленны.

Основным источником загрязнений в чистом помещении является человек. Это объясняется структурой кожи человека и динамикой ее изменения.

Чистое помещение – сложное и дорогостоящее инженерное сооружение. Для обеспечения заданного класса чистоты важен комплексный подход. Нужно следовать основным принципам обеспечения чистоты на всех этапах создания чистого помещения.

Можно условно выделить следующие основные принципы создания чистых помещений:

– определение необходимого вида потока воздуха (однонаправленный, неоднонаправленный, смешанный) и принципов разделения зон с различными классами чистоты;

– формирование потоков воздуха. Обеспечение необходимой скорости однонаправленного потока воздуха для помещений классов Р 5 (100) и более чистых;

– обеспечение необходимого баланса воздухообмена, необходимой доли наружного Р 5 (100) и менее чистых – кратности воздухообмена;

– применение фильтров и многоступенчатой фильтрации воздуха;

– обеспечение необходимого перепада давления;

– использование эффективных проектно-конструкторских решений, надлежащих материалов и оборудования;

– контроль параметров воздуха: концентрации частиц, концентрации микроорганизмов, однонаправленности и скорости однонаправленного потока воздуха, перепада давления, целостности фильтров, времени восстановления параметров чистого помещения;

– правильная эксплуатация чистых помещений, включая требования к одежде, порядку очистки и дезинфекции;

– обучение персонала, выполнение им требований личной гигиены, поведение, переодевания и пр.

Задача технологии чистых помещений сводится к тому, чтобы регулировать и контролировать уровень загрязнения воздуха. Для реализации этой задачи в технологии чистых помещений используют сочетание трёх принципиальных подходов: фильтрацию воздуха, соответствующую организацию воздушных потоков в чистых помещениях и обеспечение перепада давления между помещениями.

Одежда персонала, работающего в чистых помещениях, – совершенно особый компонент «технологии чистоты». Кажущаяся простота и непритязательность понятия «одежда»

психологически мешают с достаточной и необходимой серьезностью организовать «службу одежды» на предприятиях, имеющих чистые помещения. Одежда работающего в них персонала, правила ее использования, регламент поведения персонала в рабочих зонах – один из факторов, которые определяют чистоту функционирующих чистых помещений.

Экономия средств и невнимание к одежде может привести к катастрофическому обесцениванию первоклассного чистого помещения. Следовательно, основная функция одежды чистых помещений состоит в защите технологической среды и производимого продукта от загрязнений, которые выделяет человек. Загрязнения должны остаться внутри одежды в так называемом пододежном пространстве, и на внутренней поверхности одежды.

К сожалению, часто даже знание об угрозе загрязнения от неправильно одетого персонала не заставляет соответствующие службы уделять должное внимание проблемам правильного одевания, регламентированию поведения в чистом помещении и контроля за процессом деконтаминации (очистки) одежды. По сути, одежда для чистых помещений должна служить специфическим барьером или фильтром, который, в конечном счете, определяет чистоту воздуха в функционирующем чистом помещении. В пододежном пространстве должны задерживаться 60–95% частиц определенного размера, которые генерирует человек.

Несомненно, что создание и развитие современного фармацевтического производства невозможно без новейших разработок «технологии чистоты» – отрасли, пик развития у которой еще впереди. Без чистоты производственной среды современное качество немыслимо.

Стандарты по технике чистых помещений можно разделить на следующие категории:

международные стандарты; национальные стандарты; стандарты обществ инженеров. К международным относятся стандарты Международной организации по стандартизации ИСО (ISO) и стандарты Европейской комиссии по стандартизации CEN. Первые шаги гармонизации стандартов разных стран были сделаны в ограниченном регионе – в странах Европейского сообщества в рамках Европейской организации по стандартизации CEN.

Затем эту работу повела ИСО – Международная организация по стандартизации.

В 1993 г. в рамках ИСО был создан технический комитет ISO/TC 209 «Cleanrooms and Associated Controlled Environments» –ИСО/ТК 209 «Чистые помещения и связанные с ними контролируемые среды». В его составе работают семь рабочих групп:

– классификация чистых помещений;

– биозагрязнения;

– метрология и методы контроля;

– проектирование и строительство;

– эксплуатация чистых помещений;

– термины, определения и единицы измерения;

– миниокружения и изоляторы.

К настоящему времени разработаны и приняты ИСО семь стандартов по технике чистых помещений. В России эти стандарты переводятся на русский язык и принимаются в установленном порядке в качестве национальных стандартов ГОСТ Р ИСО, либо принимаются как межгосударственные стандарты СНГ (ГОСТ ИСО).

Среди них выделяются следующие стандарты ИСО по основным направлениям техники чистых помещений:

– ИСО–14644–1: Чистые помещения и связанные с ними окружающие среды. Часть 1:

Классификация чистоты чистых помещений и чистых зон по аэрозольным загрязнениям;

– ИСО–14644–2: Чистые помещения и связанные с ними окружающие среды. Часть 2:

Методы контроля чистых помещений и связанных с ними контролируемых сред с целью подтверждения их соответствия требованиям в процессе эксплуатации;

– ИСО–14644–3: Чистые помещения и связанные с ними окружающие среды. Часть 3:

Метрология и методы контроля;

– ИСО–14644–4: Чистые помещения и связанные с ними окружающие среды. Часть 4:

Проектирование, строительство и ввод в эксплуатацию чистых помещений;

– ИСО–14644–5: Чистые помещения и связанные с ними окружающие среды. Эксплуатация чистых помещений;

– ИСО–14698–1 – ИСО–14698–8: Чистые помещения и связанные с ними окружающие среды. Контроль биозагрязнений;

окружающие среды. Основные принципы. – Термины и определения.

В России утвержден стандарт ГОСТ Р 50766–95 «Помещения чистые. Классификация.

Методы аттестации. Основные требования». Стандарт гармонизирован со стандартом ИСО–14644–1. Кроме того, стандарт содержит рекомендации по проектированию, аттестации и эксплуатации чистых помещений, включая методы определения счетной концентрации аэрозольных частиц. Эти положения отражены в ГОСТ Р 52249–2004 «Правила производства и контроля качества лекарственных средств», который гармонизирован с правилами GMP Европейского союза. После этого, с 1 января 2005 года соблюдение правил GMP в фармацевтическом производстве в Российской Федерации является обязательным.

Данный документ, как и любые международные стандарты, рассчитан на использование в странах с разными системами государственного регулирования лекарственного рынка.

Поэтому в нем сформулированы цели и принципы, которыми следует руководствоваться при производстве фармацевтической продукции, а не способы или средства их реализации.

Такой подход обеспечивает документу долгую жизнь, в то время как детализация, конкретные указания и требования вызывают быстрое устаревание.

GMP это не сборник инструкций, указаний или жестких требований к производству.

Это общее руководство, содержащее принципы, которыми необходимо руководствоваться в производстве фармацевтической продукции, чтобы обеспечить ее качество.

Концепция «качества», провозглашенная ВОЗ, включает следующие элементы:

– соответствие препарата требованиям спецификаций, т.е. Государственной фармакопее, фармакопейной статье, фармакопейной статье предприятия;

– эффективность и безопасность его применения;

– производство в соответствии с GMP.

Рассмотрим основные разделы GMP, касающиеся промышленной чистоты и контроля перекрёстного загрязнения. Чистота помещений является одним из факторов, обеспечивающих выполнение принципиального исходного положения GMP. ЛС должно содержать только то, что входит в его состав. Остальное относится к загрязнениям. В производстве ЛС решающее значение может иметь любой из трех загрязняющих факторов:

– биологические микроорганизмы;

– аэрозольные частицы;

– химические загрязнения.

Чистота окружающей среды и оборудования – одно из критических требований GMP.

Для выполнения его и служат чистые помещения.

Правила производства ЛС GMP уделяют первостепенное внимание чистоте помещений, где производятся нестерильные ЛС. Согласно ГОСТ 52249–2004, производство нестерильных ЛФ должно осуществляться в помещениях классов чистоты С и D. При этом важно учитывать то, что в этих помещениях предусматривается нормирование содержания жизнеспособных микроорганизмов в воздухе. Нормирование содержания механических частиц, как правило, не предусматривается.

Правила GMP не устанавливают конкретных количественных требований к чистоте помещений для производства нестерильных продуктов. В то же время на них распространяется общее положение обеспечения «минимального риска загрязнения материалов и продукции». Поверхности производственных помещений «должны быть гладкими, без трещин и открытых стыков», должна быть обеспечена «эффективная система вентиляции, оборудованная устройствами контроля воздуха». Многие предприятия, чтобы выполнить эти требования, используют для нестерильного производства чистые помещения, хотя в нормативных документах этого требования нет. Эта непривычная для нас постановка дела: прямых норм на чистоту нет, контроля за выполнением этих требований нет, а заводы добровольно вкладывают средства в обеспечение чистоты и повсеместно стремятся обеспечить чистоту при производстве нестерильных ЛС. Это нужно для обеспечения стабильности препарата, обеспечения его длительного срока годности, чтобы он не портился под воздействием микроорганизмов. Чистое помещение служит для защиты продукта от микроорганизмов. Благодаря чистоте воздуха срок годности препарата может достигать 3– лет.

На предприятии должны быть разработаны правила личной гигиены персонала с учетом особенностей конкретного производства. В производственных зонах запрещаются курение, прием пищи или употребление напитков, жевание резинки, а также хранение пищевых продуктов, напитков, табачных изделий и личных ЛС. Непосредственный контакт операторов с открытой продукцией или любыми деталями оборудования, контактирующими с продукцией, не допускается.

Планирование рабочих зон внутри производства должно обеспечивать последовательное и логичное размещение оборудования и материалов, сводить к минимуму риск перепутывания различных ЛС или их компонентов, перекрестного загрязнения и ошибочного выполнения или пропуска любых операций по производству или контролю.

Одним из самых важных элементов, определяющих качество выпускаемой продукции, является оборудование для производства лекарственных препаратов. Оборудование не должно представлять никакой опасности для продукции. Части оборудования, соприкасающиеся с продукцией, не должны выделять или абсорбировать вещества, которые могли бы повлиять на качество продукции. Оборудование не должно выделять загрязнений в окружающую среду в процессе работы и исключать возможность перекрестной контаминации.

Конструкция производственного оборудования должна обеспечивать удобство и возможность его очистки. Операции по очистке оборудования должны выполняться в соответствии с СОП. Оборудование следует содержать в сухом и чистом состоянии.

Современные конструкции оборудования стремятся не только к безупречной функциональности, но и к максимальной защите продукта от загрязнений: отсутствие смазок в зоне контакта с продуктами, отсутствие «мертвых зон», недоступных для мойки и чистки и т.д. В частности, оборудование современных конструкций снабжено устройствами очистки на месте и/или стерилизации на месте. Это касается емкостного оборудования (мойка и стерилизация), дистилляторов (удаление накипи), систем водораспределения (стерилизация), таблетных прессов (очистка пресс-инструмента и зоны таблетирования) и др.

К конструкции оборудования предъявляются следующие требования:

– поверхности оборудования, соприкасающиеся с исходным сырьем, полупродуктами или готовым продуктом, должны быть гладкими и изготовленными из нетоксичного, стойкого к коррозии материала, который не реагирует с используемым сырьем или материалами и выдерживает обработку дезинфицирующими средствами и/или стерилизацию;

– все детали оборудования, контактирующие с используемым сырьем, материалами и полупродуктами, должны быть съемными для облегчения их мойки, обработки дезинфицирующими средствами или стерилизации;

– оборудование не должно загрязняться материалами, используемыми для его эксплуатации (например, смазочными веществами) во избежание ухудшения качества и загрязнения готовых продуктов;

– все передающие устройства (транспортеры, цепные передачи, приводы трансмиссии) должны быть закрыты или отгорожены;

– бункеры, емкости и аналогичное оборудование должны быть закрыты.

Следует исключить возможность загрязнения исходных материалов или продуктов другими материалами или продуктами. В процессе производства риск случайного перекрестного загрязнения возникает при неконтролируемом выделении пыли, газов, испарений, аэрозолей или микроорганизмов из материалов (продукции) и от остаточных загрязнений на оборудовании и одежде людей. Степень риска зависит от типа загрязнения и продукта, подверженного загрязнению.

Для предотвращения перекрестного загрязнения следует предусмотреть следующие технические и организационные меры:

– производство в выделенных зонах (обязательное для пенициллинов, живых вакцин, бактериальных препаратов из живых микроорганизмов и некоторых других биологических препаратов) или разделение циклов производства во времени с соответствующей уборкой помещения и оборудования между циклами;

– организация воздушных шлюзов и вытяжных устройств;

– сведение к минимуму риска контаминации, вызываемого рециркуляцией или повторным поступлением необработанного или недостаточно обработанного воздуха;

– ношение защитной одежды внутри зон, хранение защитной (специальной) одежды в пределах зон производства продукции с высоким риском перекрестного загрязнения;

– применение методик очистки и деконтаминации с известной эффективностью, так как неэффективно очищенное оборудование является обычным источником перекрестной контаминации;

– использование «закрытых систем» производства;

– контроль наличия остатков предыдущего продукта или моющих средств и маркировка оборудования с указанием статуса чистоты.

При производстве одного наименования ЛС при переходе от серии к серии очистка оборудования после каждой серии, как правило, необязательна. Однако такие действия необходимо обосновать и установить интервалы времени между проведением очисток с указанием используемых методов.

При переходе к выпуску другого наименования ЛС проведение очистки оборудования обязательно, а применяемые процедуры должны быть валидированы. Валидация – это процесс документального подтверждения достижения разумной уверенности в том, что процесс, методы, оборудование или система делают то, для чего они предназначены, т.е.

надежность, стандартность и воспроизводимость результата.

Валидацию процесса очистки оборудования проводят для каждой единицы оборудования. Как правило, необходимо проводить валидацию только процесса очистки поверхностей оборудования, непосредственно контактирующих с продукцией. Валидацию считают удовлетворительной при последовательном получении трех положительных результатов.

Можно сгруппировать похожие препараты с учетом их физических характеристик, состава, дозировки (например, препараты, относящиеся к одной фармакотерапевтической группе или препараты одного наименования, но различной дозировки) или процессы и проводить валидацию только для одного представителя каждой группы. Такая практика, называемая «группированием» (bracketing), позволяет не проводить валидацию для каждого отдельного, но похожего препарата и процесса. Затем можно провести одно валидационное исследование в условиях наихудшего случая, в котором будут учтены все значимые критерии, такие как максимальная дозировка активного вещества, минимально допустимое количество остатков предыдущего продукта и др.

Ревалидацию следует проводить в случаях изменения оборудования, состава продукта, технологических процессов, процедуры очистки, а также периодически через определенные интервалы времени.

Оборудование, применяемое для производства ЛС, является критическим элементом, определяющим качество выпускаемой продукции. Проведение валидации очистки оборудования включает в себя следующие этапы:

– процесс очистки оборудования;

– визуальную проверку чистоты оборудования на отсутствие видимых загрязнений;

– отбор проб;

– передачу проб в химическую и микробиологическую лаборатории отдела контроля качества;

– заполнение протокола валидации;

– анализ еще двух серий продукта;

– анализ полученных результатов и сравнение их с критериями приемлемости;

– составление отчета о валидации.

После окончания процесса валидации очистки и проведения всех необходимых анализов должен быть составлен отчет о валидации. Отчет должен включать:

– описание всех отклонений в процедурах очистки или отбора проб по сравнению с протоколом валидации;

– все результаты аналитических испытаний, включая все наблюдения, сделанные во время валидации;

– заключение по результатам испытаний со всеми необходимыми рекомендациями, сделанными на основании полученных результатов.

Отбор проб должен проводиться после окончания процесса очистки и сушки оборудования в течение времени, указанного в протоколе валидации. При проведении процесса валидации очистки оборудования, оно должно быть проверено на наличие остатков активных фармацевтических субстанций, вспомогательных веществ, моющих средств.

Сначала следует провести визуальную проверку оборудования на наличие видимых остатков.

Прямой отбор проб с поверхности (метод мазков) используется для оценки качества очистки тех поверхностей оборудования, с которыми может соприкасаться продукт. Этот метод рекомендуется использовать для оборудования, имеющего неровные поверхности или не дающего возможности получить образцы методом смыва (мельницы, таблетпрессы, гомогенизаторы). Пробы следует отбирать не менее чем с пяти участков с помощью трафарета, имеющего стандартный размер, например, 25 или 100 см2, и тампона, пропитанного растворителем для рассматриваемых активных веществ. Затем содержимое тампона экстрагируют и определяют количественный уровень активного вещества в жидкости. Далее нужно рассчитать общее количество остатков, присутствующих на поверхности. Этот конечный уровень загрязнения должен удовлетворять критерию приемлемости, установленному ранее при проведении экспериментальных исследований.

Предварительно следует определить также пригодность материала тампона и среды, используемых для отбора проб. Выбор материала тампона может повлиять на возможность точного отбора пробы. Поэтому в экспериментальных исследованиях следует установить, какое количество активного вещества переходит с тампона в среду для отбора проб и/или в растворитель.

Метод смывов (анализ последних промывных вод – final rinse) удобен для оценки эффективности очистки систем, к которым нет прямого доступа, или частей оборудования, которые нельзя снимать. Использование этого метода позволяет проводить отбор проб с большей площади поверхности, а также для очищаемых на месте систем.

При использовании этого метода очищенное и высушенное оборудование промывают небольшим количеством воды очищенной или воды для инъекций. К воде можно добавить небольшое количество спирта или поверхностно-активных веществ для увеличения растворения остатков активных веществ. Затем нужно отобрать и оценить пробы жидкости на содержание остатков активных веществ (мг/мл), а затем рассчитать общее количество содержащихся в смывах остатков и сравнить полученные результаты с критериями приемлемости. Часто в качестве жидкости для отбора проб используются пробы воды, применяемой для последнего ополаскивания оборудования.

Значительной трудностью при использовании данного метода является возможность получения большого разведения, поэтому количественное содержание активного вещества не всегда можно будет определить имеющимся аналитическим методом. Поэтому следует применять ограниченный общий объем жидкости, используемой для смыва, или концентрировать пробу нагреванием или с помощью вакуумной сушки с учетом стабильности остатков.

Однако частое использование каждого из названных выше методов по отдельности не обеспечивает требуемой надежности результатов. Для надежной оценки равномерности распределения остатков на поверхности оборудования нужно проанализировать пробы, полученные методом мазка с поверхности, в сочетании с пробами, полученными методом смывов. Кроме того, возможно использование метода «плацебо», заключающегося в производстве серий плацебо на очищенном оборудовании в обычных производственных условиях с последующим исследованием их на наличие загрязнений.

Важным вопросом является оценка эффективности процедур очистки в отношении удаления остатков моющих средств. Моющие средства не входят в состав продукта. Они предназначены только для облегчения проведения очистки оборудования и не должны оставаться на оборудовании после последней промывки, поэтому требуется установить допустимые пределы содержания моющего средства после очистки, для чего необходимо знать их состав. В идеальном случае остатки моющих средств не должны быть обнаружены. Во время проведения валидации процесса очистки необходимо учитывать способность моющего средства к разложению.

Предприятие само должно установить допустимые пределы содержания остатков продуктов (критерии приемлемости), принимая во внимание используемые вещества и их терапевтическую дозу. Их значения должны быть обоснованными, достижимыми и поддающимися проверке.

К установлению пределов может быть применен любой из следующих подходов:

– проведение валидации очистки для каждого из выпускаемых препаратов;

– группирование препаратов и выбор препарата, представляющего «наихудший случай»;

– группирование препаратов по группам риска (например, легкорастворимые препараты, препараты со сходной активностью, высокотоксичные препараты, а также препараты, которые трудно обнаружить).

Согласно рекомендациям, допустимое количество остатков препарата должно соответствовать следующим критериям:

– в максимальной суточной дозе препарата может содержаться не более 0,1% средней терапевтической дозы любого произведенного перед ним препарата;

– в препарате не должно содержаться более 10 ppm любого другого препарата;

– после завершения процедур очистки на оборудовании не должно быть видимых следов;

– предел содержания для определенных ингредиентов, являющихся аллергенами или сильнодействующими веществами, должен быть ниже предела обнаружения, установленного с помощью самых современных аналитических методов.

Многие медицинские препараты должны быть стерильными, т.е. быть свободными от присутствия в них каких-либо микро-организмов. Поддержание стерильности производимых медицинских препаратов является сложной проблемой фармацевтической промышленности и требует немалых затрат. Нормы к микробиологической чистоте существуют и для нестерильных препаратов.

Отсутствие микроорганизмов в производственной и окружающей среде можно сравнить с вакуумом. Микроорганизмы вездесущи, поскольку являются неизбежными спутниками жизни. Стерильные медицинские препараты не должны содержать не только патогенных и/или условно-патогенных микроорганизмов, но и любых микроорганизмов, присутствие которых в препарате может нанести вред самому препарату и пациенту.

Существует два способа производства стерильных препаратов. Один способ заключается в обеспечении стерильности на последней стадии производства – так называемая финишная стерилизация, т.е. стерилизация в герметичной первичной упаковке. Примером могут служить многие лекарственные препараты, подвергаемые после изготовления и упаковки стерилизации.

Большинство же препаратов не выдерживают методов финишной стерилизации в упаковках. По этой причине значительная часть стадий производства таких препаратов нуждается в обеспечении условий асептики и стерильности, а также применении стерилизующей фильтрации жидкостей.

Оба вида стерильной продукции должны производиться в чистых помещениях, требования к которым содержатся в правилах GMP.

Пути проникновения микроорганизмов в готовые ЛС многообразны. Это сырье и промежуточные продукты, вода и газы, используемые в производстве. Другим источником микробной контаминации является окружающая среда.

Меры, направленные на предотвращение микробной контаминации препарата в процессе его изготовления, должны быть адекватны степени опасности источника микробной контаминации. Изоляция от внешней среды достигается с помощью систем вентиляции, оснащенных соответствующими системами фильтров и обеспечивающими избыточное давление в чистых помещениях. Предотвращение микробной контаминации через источники водогазоснабжения достигается с помощью стерилизации этих сред тепловым методом или с помощью фильтров. Однако самую серьезную опасность микробной контаминации представляет человек, который находится (работает) в чистом помещении.

Предотвращение микробной контаминации через человека достигается применением защитной (рабочей) одежды. Но даже при этих условиях производственная активность человека сопровождается выделением в воздух микроорганизмов, хотя и в значительно меньшем количестве.

Эффективность защитной одежды весьма высока и позволяет до минимума снизить опасность микробной контаминации препарата.

Таким образом, если обеспечена стерильность исходных материалов, сырья и потребляемых в производстве сред (воды, растворов, газов), если системой вентиляции обеспечена подача стерильного воздуха, то основное внимание должно уделяться мерам по предотвращению микробного загрязнения производственной среды, причиной которого является находящийся в чистом помещении оператор.

6. ХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА

ЛЕКАРСТВЕННЫХ ВЕЩЕСТВ

Одним из основных этапов фармакопейного анализа является количественное определение активного вещества в ЛС. Оно проводится в целях установления содержания ЛВ в препарате и заключения о возможности его использования с учетом высших разовых и суточных доз приема. Содержание активного вещества определяют в индивидуальном виде и в ЛС. На этом этапе испытаний используются традиционные методы аналитической химии: химические и физико-химические. Рассмотрим основные химические методы анализа ЛВ – титриметрические. Обычно количественное содержание активного вещества в ЛС устанавливается по его химическому свойству, обусловленному наличием в составе определенной функциональной группы, катиона или аниона. Большинство этих методов обеспечивает достаточную точность определения, однако они не являются специфическими, особенно для органических веществ.

В зависимости от типа реакций, лежащих в основе каждого метода, титриметрические методы разделяют на четыре группы: кислотно-основные, окислительновосстановительные, осадительные и комплексонометрические. Они отличаются друг от друга природой используемых равновесий, индикаторами, стандартными растворами, а также способами определения эквивалентной массы. Наряду с этой классификацией в практике часто применяют разделение объемных методов в соответствии с типом веществ, используемых в качестве титрантов, например, алкалиметрия, ацидиметрия, аргентометрия, комплексонометрия, перманганатометрия, иодометрия и т.д. По способу проведения титрования различают методы прямого и обратного титрования.

Химические титриметрические методы количественного анализа имеют относительную погрешность определения 0,3–0,5% при массе определяемого вещества 0,1–0,5 г.

Источниками ошибок являются измерительные инструменты (весы, мерная колба, пипетка, бюретка) и фиксирование конечной точки титрования (КТТ). Для повышения правильности определения ставят контрольный опыт. Он заключается в проведении всех операций, предусмотренных методикой, в отсутствие определяемого компонента. Результат контрольного опыта вычитают из результата определения.

Согласно наиболее признанной теории кислот и оснований – протолитической теории Бренстеда и Лоури, кислотно-основные реакции осуществляются за счет переноса протона от кислоты к основанию. Иначе говоря, кислота является донором, а основание – акцептором протонов.

Кислота и основание, которые отличаются содержанием протона, называются сопряженными, например Н2О и ОН-; NH4+ и NH3; СН3 СООН и СН3СОО–.

Метод кислотно-основного титрования основан на реакции кислотно-основного взаимодействия, которую в общем виде можно представить следующим образом:

НА В НВ А

Кислоты (нейтральные молекулы, катионы или анионы) могут отдавать протон растворителю или протон–координирующему основанию, при этом образуется ион гидроксония Н3О+ или в общем случае гидроксониевый ион. Чем сильнее донорская кислота, тем слабее соответствующее акцепторное основание:

Сила кислоты или основания в значительной степени зависит от кислотно-основных свойств растворителя. В любом растворителе самой сильной кислотой является сольватированный протон – ион лиония, а самым сильным основанием – ион лиана (анион растворителя). Так, в водном растворителе самой сильной кислотой является ион гидроксония Н3О+, а самым сильным основанием – ион гидроксида ОН–; в жидком аммиаке самая сильная кислота – ион аммония NH4+, а самое сильное основания – амид-ион NH2– ; в ледяной кислоте уксусной самое сильное основание ацетат-ион СН3СОО –, а самая сильная кислота – ион ацетония СН3СООН2+.

Таким образом, метод кислотно-основного титрования основан на следующих реакциях:

где SH – растворитель.

В частности, для водных растворов:

Сила кислоты в водном растворе определяется тем, насколько полно она будет отдавать протоны молекуле воды, а сила основания в том, насколько полно оно акцептирует протоны молекул воды, и оценивается константой равновесия реакции переноса протона между ними и молекулой растворителя. Чем больше константа равновесия, тем сильнее кислота или основание. Константу равновесия обозначают для кислоты Ка, для основа ния – Кb.

Хлороводород в воде (НСl + H2O Cl – + H2O+) является сильной кислотой, так как передача протона от НСl к Н2О происходит в гораздо большей степени, чем присоединение Cl– к Н2О, равновесие реакции смещено значительно вправо и Ка1.

Сильными кислотами являются НСlО4, H2SO4, HI, HNO3 и др. У слабой кислоты протонодонорная способность гораздо слабее, чем у ионов гидроксония, и Ка мала, например, Ка уксусной кислоты равна 1,74·10 –5.

Непосредственным титрованием стандартными растворами щелочей и сильных кислот определяют содержание растворимых в воде сильных и слабых кислот и оснований, а также солей, образованных сильными основаниями и слабыми кислотами, например натрия гидрокарбоната, натрия тетрабората и др. Константы Ка и Кb кислот и оснований должны быть не менее 10–7, так как величина скачка титрования существенно зависит от Кдисс. Так, при титровании 0,1 н растворов сильных кислот и щелочей скачок титрования составляет около 6 единиц рН; при Ка (Кb) = 10–3 –3–4 единицы рН; при Ка (Кb) = 10–5 – 2– 2,5 единицы рН; при Ка (Кb) = 10–8–10–9 скачок титрования вырождается в точку и определение конца титрования становится практически невозможным.

Растворы определяемых кислот и оснований не должны быть сильно разбавленными, поскольку величина скачка титрования зависит от концентрации титруемой кислоты или основания. Так, при титровании 0,1 н раствора сильной кислоты раствором щелочи, и наоборот, скачок титрования составляет около 6 единиц рН, при концентрации 0,01 н – соответственно 3–4 единицы рН, при 0,001 н – 1–4 единицы рН, при 0,0001 н скачок титрования вырождается в точку. При титровании 0,001 н раствора сильной кислоты или щелочи правильность определения резко падает. Таким образом, возможность определения кислот и оснований лимитируется как константой диссоциации определяемого вещества, так и его концентрацией в растворе.

Кроме прямого титрования, применяется обратное титрование (по остатку) и титрование по заместителю.

Обратное кислотно-основное титрование принято для веществ, реагирующих со щелочами и сильными кислотами, медленно, но практически необратимо. К этой группе веществ относятся малорастворимые в воде оксиды и карбонаты, например оксид магния, карбонат магния.

Титрование по заместителю (косвенное титрование) используется для веществ, обладающих слабо выраженными кислотно-основными свойствами или практически не обладающими ими, например титрование теофиллина, теобромина, прегнина по кислоте азотной, которая выделяется при реакции указанных веществ с нитратом серебра.

При прямом определении результат анализа характеризуется меньшей ошибкой, чем при определении по остатку и по заместителю.

Стандартными реагентами в методе кислотно-основного титрования всегда служат сильные кислоты или сильные основания, так как реакция с их участием протекает более полно, чем с участием их слабых аналогов.

Определить КТТ можно двумя способами: визуально (индикаторный способ) и инструментально (чаще потенциометрически). Для анализа ЛС чаще применяется индикаторный способ.

Кислотно-основные индикаторы обычно являются органическими соединениями, проявляющими свойства слабых кислот или оснований. Их можно разделить на несколько групп:

– фталеиновые индикаторы (фенолфталеин и тимолфталеин), которые бесцветны в умеренно кислых растворах и окрашены в щелочных растворах;

– сульфофталеиновые индикаторы, среди которых находит применение феноловый красный;

– азоиндикаторы (метиловый оранжевый и метиловый красный), которые с увеличением щелочности среды меняют окраску с красной на желтую; точка перехода окраски индикатора несколько смещена в кислую область.

При визуальном определении КТТ с кислотно-основным индикатором ошибка в среднем составляет около ±0,5 единицы рН. Сравнение окрасок титруемого раствора с окраской стандартного раствора, содержащего такое же количество индикатора («свидетель») при соответствующим значении рН, часто позволяет снизить ошибку до 0,1 единицы рН и меньше.

6.1.1. Кислотно-основное титрование в водной среде Сильные кислоты титруют раствором щелочи по индикатору метиловому оранжевому.

Таким образом проводят определение хлороводородной кислоты. Более слабые кислоты (бензойную, салициловую, аскорбиновую и др.) титруют, используя индикаторы, изменяющие окраску в щелочной среде (фенолфталеин, феноловый красный). Причем для растворимых в воде препаратов растворителем служит вода, для карбоновых кислот, большинство из которых нерастворимы в воде, растворителями являются 95%-ный спирт, реже – ацетон.

Кислоту ацетилсалициловую во избежание гидролиза по сложноэфирной связи растворяют в охлажденном до 8–9оС нейтральном 95% спирте и титруют раствором щелочи, используя индикатор фенолфталеин:

Борная кислота принадлежит к очень слабым кислотам: константа диссоциации ее 5,75·10–10. Соль, образующаяся при титровании этой кислоты щелочью, очень сильно гидролизуется, и раствор становится щелочным значительно ранее достижения эквивалентной точки.

Известные методы определения борной кислоты основаны большей частью на том, что она реагирует с многоатомными спиртами, образуя более сильные комплексные кислоты, которые можно точно титровать, используя индикатор фенолфталеин. Для этой цели было предложено добавлять нейтральный глицерин:

Аминокислоты жирного ряда (кислота глутаминовая, метионин) могут быть оттитрованы как кислоты (по карбоксильной группе) 0,1 н раствором гидроксида натрия. Во избежание мешающего влияния аминогруппы (образование внутренней соли – бетаина) добавляют раствор формальдегида; при этом образуется N-метиленовое производное (основания Шиффа), и таким образом устраняется влияние аминогруппы на карбоксильную группу:

R CH COOH HC

Эти соединения характеризуются слабыми основными свойствами и значительно большими (на 2–4 порядка) константами кислотной диссоциации, чем аминокислоты.

Двухосновная аминокислота (глутаминовая) может быть оттитрована как одноосновная в водном растворе по индикатору бромтимоловому синему. В присутствии раствора формальдегида или в спиртовом растворе кислота глутаминовая титруется раствором щелочи как двухосновная:

Косвенный метод нейтрализации, основанный на выделении азотной кислоты при взаимодействии препаратов с раствором серебра нитрата, применяется для количественного определения теобромина и теофеллина, прегнина и этинилэстрадиола. Выделяющуюся азотную кислоту титруют раствором гидроксида натрия. В основе определения теофеллина лежит реакция:

В молекулах этинилэстрадиола и прегнина содержится этинильный радикал –С=СН, атом водорода которого может легко выделяться в виде протона и замещаться атомами металлов с образованием солей – ацетиленидов. С серебра нитратом этинилэстрадиол образует двойную соль, состоящую из серебряной соли этинилэстрадиола и шести молекул нитрата серебра:

Выделившуюся азотную кислоту титруют раствором щелочи.

Ряд ЛС, относящихся к неорганическим и органическим основаниям, а также соли сильных оснований и слабых кислот могут быть определены количественно путем титрования растворами соляной кислоты. Более сильные основания, например кодеин, титруют по индикатору метиловому красному, более слабые, например гексаметилентетрамин, – по метиловому оранжевому. Определение можно проводить двумя методами: разрушением препарата при кипячении с избытком 0,1 н раствора серной кислоты с последующим титрованием этого избытка 0.1 н раствором гидроксида натрия или титрованием 0,1 н раствором хлороводородной кислоты как однокислотного основания:

Лекарственные препараты, содержащие в своем составе сложноэфирную группу (например, ацетилсалициловая кислота, фенилсалицилат, эстрадиола дипропионат), могут быть определены с помощью реакции гидролитического расщепления с последующим титрованием избытка щелочи раствором кислоты:

Процесс гидролиза проводится при нагревании.

Метод кислотно-основного титрования в неводных растворителях применяется для количественного определения слабых кислот с Ка 10–8 (барбитураты, сульфаниламидные препараты и др.), слабых оснований с Кb 10–8 (кофеин, резерпин и др.), титрование которых в воде затруднено или невозможно из-за слабых кислотно-основных свойств. Этот метод позволяет с большой точностью определить многие ЛС, которые при титровании в водных растворах не дают резких конечных точек титрования. Конечная точка титрования чаще всего определяется индикаторным или потенциометрическим способом.

Под влиянием неводных растворителей резко изменяются свойства различных веществ. В зависимости от растворителя одно и то же вещество может быть кислотой, основанием, амфотерным или нейтральным соединением, сильным или слабым электролитом.

Сила кислоты или основания определяется степенью их взаимодействия с растворителем. По характеру участия в кислотно-основном процессе все растворители делятся на две большие группы: апротонные и протолитические.

Апротонные растворители – это химические соединения нейтрального характера, молекулы которых не ионизированы и не способны ни давать, ни присоединять протон. Апротонные растворители не вступают во взаимодействие с растворённым веществом: к таким растворителям относятся многие углеводороды (бензол, толуол, гексан) и их галогенпроизводные (хлороформ, четырёххлористый углерод, дихлорэтан и др.). Апротонные растворители часто добавляют к так называемым ионизирующим растворителям для подавления сольволиза (термин, сравнимый с гидролизом в водной среде) продукта нейтрализации, что способствует более чёткому установлению конца титрования.



Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 6 |
 


Похожие работы:

«СИБИРСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ПОТРЕБИТЕЛЬСКОЙ КООПЕРАЦИИ БЕЗОПАСНОСТЬ ЖИЗНЕДЕЯТЕЛЬНОСТИ Программа, методические указания и задания контрольной и самостоятельной работы студентов заочной формы обучения специальности 080502.65 Экономика и управление на предприятии (по отраслям) Новосибирск 2010 Кафедра оборудования предприятий торговли и общественного питания Безопасность жизнедеятельности : программа, методические указания и задания контрольной работы и самостоятельной работы студентов заочной формы...»

«Утверждаю Министр нефтяной промышленности Н.А.МАЛЬЦЕВ 8 декабря 1981 года Согласовано Постановлением Секретариата ЦК профсоюза рабочих нефтяной и газовой промышленности от 15 октября 1981 г. N Срок введения установлен с 1 февраля 1982 года Вводится впервые РУКОВОДЯЩИЙ ДОКУМЕНТ СИСТЕМА ОРГАНИЗАЦИИ И УПРАВЛЕНИЯ КОМПЛЕКСОМ РАБОТ ПО ОБЕСПЕЧЕНИЮ БЕЗОПАСНОСТИ ДОРОЖНОГО ДВИЖЕНИЯ НА ТРАНСПОРТЕ НЕФТЯНОЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ РД 39-22-637- Система организации и управления комплексом работ по обеспечению...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ Рецензент: к.т.н., доц. Романова А.В. РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное агентство по образованию РФ Методические указания к выполнению курсового проекта по специальности Технология молока и молочных продуктов / Восточно-Сибирский государственный Сост. Г.Б Лев, Улан-Удэ, ВСГТУ, 2006. - 59 С. технологический университет Рассматриваются вопросы, связанные с порядком выбора темы, структурой и требованиями к выполнению курсового проКафедра Технология молочных...»

«Чтение и использование факсимильных карт погоды Введение. 1. Гидрометеорологическая информация, поступающая на суда. 2. Чтение факсимильных карт. 2.1. Заголовок карты. 2.2. Барический рельеф и барические образования. 2.2.1.1. Тропические циклоны. 2.3. Гидрометеорологические предупреждения. 2.4. Фронты. 2.5. Информация гидрометеостанций. seasoft.com.ua ВВЕДЕНИЕ Анализ аварийности мирового транспортного флота, постоянно проводимый Ливерпульской ассоциацией страховщиков, показывает, что, несмотря...»

«Комментарий ГАРАНТа См. графическую копию официальной публикации Постановление Главного государственного санитарного врача РФ от 26 сентября 2001 г. N 24 О введении в действие санитарных правил (с изменениями от 7 апреля 2009 г., 25 февраля, 28 июня 2010 г.) На основании Федерального закона от 30 марта 1999 г. N 52-ФЗ О санитарноэпидемиологическом благополучии населения* и Положения о государственном санитарно-эпидемиологическом нормировании,** утвержденном постановлением Правительства...»

«Методические указания (материалы) студентам Рекомендуется изучить материал каждого занятия с использованием учебной литературы, проверить полученные знания по предлагаемым к каждому занятию вопросам для самоконтроля. III семестр. Занятие 1 Тема: Основные положения теории строения органических соединений. Классификация, номенклатура органических соединений. Введение в практикум. Правила техники безопасности. (4 часа, 180 минут). Содержание занятия: 1. СЕМИНАР. (150 минут). 1.1.Теория строения...»

«Министерство образования Республики Беларусь Учреждение образования “Гомельский государственный университет имени Франциска Скорины” Кафедра теоретической физики РАДИАЦИОННАЯ БЕЗОПАСНОСТЬ Учебно-методическое пособие по выполнению лабораторных работ Гомель, 2012 Авторы - составители: В.В.Андреев, доцент, кандидат физико-математических наук, зав. кафедрой кафедры теоретической физики, C.А. Лукашевич, ассистент кафедры теоретической физики. Рецензент: кафедра теоретической физики учреждения...»

«ПРИОРИТЕТНЫЙ НАЦИОНАЛЬНЫЙ ПРОЕКТ ОБРАЗОВАНИЕ РОССИЙСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ДРУЖБЫ НАРОДОВ А.А. ВАРФОЛОМЕЕВ ОСНОВЫ ИНФОРМАЦИОННОЙ БЕЗОПАСНОСТИ Учебное пособие Москва 2008 Инновационная образовательная программа Российского университета дружбы народов Создание комплекса инновационных образовательных программ и формирование инновационной образовательной среды, позволяющих эффективно реализовывать государственные интересы РФ через систему экспорта образовательных услуг Экспертное заключение – кандидат...»

«Министерство образования и науки Российской Федерации Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования “Тихоокеанский государственный университет” АДМИНИСТРАТИВНОЕ ПРАВО Методические указания к выполнению контрольных и курсовых работ для студентов по направлению 030900.62 Юриспруденция всех форм обучения и специальности 030901.65 Правовое обеспечение национальной безопасности дневной формы обучения Хабаровск Издательство ТОГУ 2013 УДК...»

«МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Кубанский государственный аграрный университет Г.А. Кравченко ЦИТОЛОГИЯ, ГИСТОЛОГИЯ, ЭМБРИОЛОГИЯ (часть 1) Методические указания для аудиторной и внеаудиторной самостоятельной работы студентов Краснодар 2010 Г.А.Кравченко Цитология и Общая гистология. Методические указания. Краснодар, КГАУ, 2010 г Печатается по решению методической комиссии факультета ветеринарной медицины. Протокол № Предназначено методическое указание для...»

«РУКОВОДЯЩИЙ ДОКУМЕНТ ОТРАСЛИ Отраслевая система обеспечения единства и требуемой точности измерений. Методические указания по поверке анализаторов параметров цифровых каналов и трактов типа EDT-135/EST-125/EST-120 1. Область применения Настоящие Методические указания распространяются на анализаторы параметров цифровых каналов и трактов типа EDT-135/EST-125/EST-120 производства фирмы Wavetek Wandel Goltermann и устанавливают методы и средства первичной, периодической и внеочередной поверок,...»

«Методические указания МУК 2.3.2.721-98 2.3.2. Пищевые продукты и пищевые добавки. Определение безопасности и эффективности биологически активных добавок к пище (утв. Главным Государственным санитарным врачом РФ 15 октября 1998 г.) Дата введения: 1 января 1999 г. ГАРАНТ: См. Методические рекомендации МР 2.3.1.1915-04 Рекомендуемые уровни потребления пищевых и биологически активных веществ, утвержденные Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 2 июля...»

«ЗАО ГЕФЕСТ Методическое пособие по эксплуатации внутреннего противопожарного водопровода г. Москва 2012г. Содержание Общие положения 1. Нормативные ссылки 2. Термины и определения 3. Технические требования 4. Испытания ВПВ 5. Примечание (ссылки на нормативно техническую документацию) 6. 1.Общие положения 1.1 Настоящее методическое пособие разработано в соответствии со статьями 45, 60, 62, 106 и 107 Федерального закона от 22 июля 2008 г. № 123-ФЗ Технический регламент о требованиях пожарной...»

«Министерство образования и науки Российской Федерации Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Амурский государственный университет Кафедра безопасности жизнедеятельности УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКИЙ КОМПЛЕКС ДИСЦИПЛИНЫ ЭКОЛОГИЯ Основной образовательной программы по специальностям: 010701.65 Физика, 130301.65 Геологическая съемка, поиск и разведка месторождений полезных ископаемых, 280101.65 Безопасность жизнедеятельности в техносфере....»

«Федеральное агентство по образованию РФ АМУРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ( ГОУВПО АмГУ ) УТВЕРЖДАЮ Зав. кафедрой БЖД _А.Б. Булгаков _2007 г ОСНОВЫ ПОЖАРОВЗРЫВОБЕЗОПАСНОСТИ И СПАСАТЕЛЬНЫЕ НЕОТЛОЖНЫЕ АВАРИЙНО-ВОССТАНОВИТЕЛЬНЫЕ РАБОТЫ УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКИЙ КОМПЛЕКС для специальности: 280101 Безопасность жизнедеятельности в техносфере Составитель: С.А. Приходько, доцент кафедры БЖД, кандидат с.-х. наук Благовещенск 2007 г. Печатается по решению редакционно-издательского совета...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ УХТИНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ТЕХНИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ Н.Д. Цхадая, В.Ф. Буслаев, В.М. Юдин, И.А. Бараусова, Е.В. Нор БЕЗОПАСНОСТЬ И ЭКОЛОГИЯ НЕФТЕГАЗОВОГО КОМПЛЕКСА ТИМАНО-ПЕЧОРСКОЙ ПРОВИНЦИИ Учебное пособие Допущено Учебно-методическим объединением вузов Российской Федерации по высшему нефтегазовому образованию в качестве учебного пособия для студентов нефтегазовых вузов, обучающихся по направлениям 553600 Нефтегазовое дело - специальности 090600,...»

«НОВЫЕ ПОСТУПЛЕНИЯ В БИБЛИОТЕКУ ВГМХА в июле-сентябре 2013 г. Бюллетень формируется с указанием полочного индекса, авторского знака, сиглы хранения и количества экземпляров документов. Сигла хранения: АБ Абонемент научной и учебной литературы; СИО Справочно-информационный отдел; ЧЗ Читальный зал; НТД Зал нормативно-технической документации; АХЛ Абонемент художественной литературы. И 379 Износ деталей оборудования. Смазка [Текст] : учебно-методическое пособие по дисц. Эксплуатация...»

«ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ОБРАЗОВАНИЮ УРАЛЬСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ЛЕСОТЕХНИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ Кафедра охраны труда Г.В. Чумарный МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ к сбору материалов и составлению раздела Безопасность проекта в дипломных проектах (работах) для студентов ИЭФ специальностей 240502, 240406, 280202, 280201 направления 280200 Защита окружающей среды Екатеринбург 2008 Печатается по рекомендации методической комиссии инженерноэкологического факультета. Протокол № 2 от 23.10.07. Рецензент В.Е....»

«Комитет по природопользованию, охране окружающей среды и обеспечению экологической безопасности Правительства Санкт-Петербурга Перепрофилирование старых промышленных площадок на территории Санкт-Петербурга Методические рекомендации по оценке экологического состояния высвобождаемых промышленных площадок и разработке плана санации Российский геоэкологический центр WTTC Werkstoffe & Technologien, Transfer & Consulting 2005г Методические рекомендации по оценке экологического состояния промышленных...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования НАЦИОНАЛЬНЫЙ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ТОМСКИЙ ПОЛИТЕХНИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ УТВЕРЖДАЮ ДИРЕКТОР ИПР _ 2014 г. Н.В. Крепша БЕЗОПАСНОСТЬ ЖИЗНЕДЕЯТЕЛЬНОСТИ Методические указания по разработке раздела Социальная ответственность выпускной квалификационной работы бакалавров и магистров Института природных ресурсов всех направлений высшего образования...»







 
© 2013 www.diss.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, Диссертации, Монографии, Методички, учебные программы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.